生物通技术点评磁式细胞分选.pdf

生物通2008 技术点评： 磁式细胞分选 在20 世纪70 年代末期到80 年代初，许多分离细胞的技术不断涌现出来。1978 年，Guesdon 等用聚丙烯酰胺琼脂糖磁珠来简单快速地分离不同的血清蛋白。没过多久，这项技术就开始应用在 分离完整的细胞上了。1982 年，Langenaur 和Schachner 在磁珠上包被了少突胶质细胞表面抗原 的单克隆抗体。通过这种磁珠，他们从混合的细胞群体（少突胶质细胞约占1.5% ）中富集目的细 胞，结果纯度达到91%。 由于磁式分选技术中，吸附和解离靶标的 更有保证，分选得到的细胞可进行培养、血液 条件仅仅需要外加磁场和撤离磁场这种极为 回输或者流式分析。磁式细胞分选系统可以分 简单的物理方法来实现，无需添加任何其他试 离出非常纯的细胞群体，而且有极好的回收率 剂或者操作步骤，也不需要太多时间，磁场力 和存活率。依据细胞频率和标记表达水平的不 对待分离样品的损伤小到可以忽略不计，因 同，纯度可达99%，回收率90%。但是磁式 此，磁式分选技术很快得到了广泛应用，免疫 细胞分选仅能作为细胞分选之用，不能进行细 磁珠也从抗体偶联磁珠发展到生物素磁珠，二 胞分析，且分选过程中难以去除死细胞的干 抗磁珠，Oligo dT 磁珠等各类纯化介质偶联 扰，难于同时进行多种标志物的分选。 磁珠，常用于分离核酸、蛋白及细胞。这项技 磁式细胞分选已经成为分离造血干细胞、 术的适应性及速度使它也成为高通量分析的 祖细胞、抗原特异性T 或B 细胞，分离残留 理想选择。例如，日渐广泛的高通量核酸分离 的肿瘤细胞等的重要工具，还可以根据细胞的 系统有相当多种试剂盒采用了磁式分选技术。 胞浆蛋白或活性细胞的分泌蛋白来进行细胞 磁式细胞分选原理 分离。磁式细胞分选还可以作为流式分选前样 品处理步骤。 磁式细胞分选的基本原理是借助偶联在 磁性微粒上抗体高特异性识别并标记目标细 磁式细胞分选产品比较著名的品牌包括 胞表面抗原，再让混有磁珠的细胞悬液通过磁 德国美天旎（MACS），Invitrogen 旗下Dynal， 场，结合了磁珠的细胞被吸附在磁场侧壁上， BD 公司，StemCell 公司，RD 公司等等， 而未结合的细胞被除去，得到纯化的目标细 生物通在此为大家逐一介绍。 胞，从而实现高效的分选和富集。磁式分选高 基础设备：磁珠 效快速，可在2-30 分钟内实现105到1011个 细胞分选。由于其原理主要借助抗体抗原识 磁式分选的主要工具包括磁珠，磁力架， 别，通常又称为免疫磁珠法。 分离柱或者分离试管。 磁式细胞分选可手动完成，简单快速，不 磁珠顾名思义，就是有磁性的微球。磁式 需要特别昂贵的设备，对实验和技术要求较 分选的原理在于利用磁珠在磁场中的磁力作 低，实验流程对细胞损伤小，无菌和细胞状态 用，将磁珠标记的细胞和其他未标记细胞分 离，因此磁珠标记的质量是磁式分选的关键。