生化分析常见交叉污染探讨与对策..pptVIP

引发交叉污染的原因 生化仪的发展变化 ①多项目,多样本处理 ②处理能力的提高(高速化) 设计共用机械部分 ①样本针,试剂针 ②比色杯 ③搅拌棒 样本针携带污染率试验（一） 同一检测项目浓度相差较大的a标本（高浓度），b标本（低浓度）。 检测顺序：a 1 , a 2 , b 1 ,b 2 , b3 计算： 评价： 以q小于10%为判断标准。局限性：结果与选择的标本浓度有关系 例1：选择高浓度的ALT样本浓度值为2020 U/L，低浓度ALT 样本第一次检测结果40 U/L，第三次检测结果20 U/L。 通过计算携带污染率q = （40 – 20）/ 2000 * 100% = 1%。 例2：选择高浓度的Cl 样本浓度值为140 mmol/L，低浓度Cl 样本第一次检测结果为86 mmol/L，第三次检测结果为80 mmol/L。 通过计算携带污染率q = （86 – 80）/ 60 * 100% = 10%。 上例中，例1的携带污染率尽管只有1%，由于结果正好在医学决定水平附近因此对临床判断有较大影响。例2的携带污 染率尽管达到了10%，但是对于临床判断不会产生大的影响。因此，使用该方法评价样本针携带污染需考虑样本的实际浓度。 样本针携带污染率试验（二） 测试顺序：3L 2H 1L 2H 4L 2H 1L 2H 1L 2H 1L （注上述顺序前的数字代表测试数量，如3L代表连续测试3个低值样本） 定义：L – L 值为紧跟在低值标本后低值标本的结果。 H – L 值为紧跟在高值标本后低值样本的结果 携带污染指标= H – L结果的平均值 – L – L结果的平均值 判断标准： 当携带污染指标小于 3SD SD是 ( L – L ) 结果的SD值。 试剂针携带污染 全自动生化分析仪一般采用双试剂针，即所有项目的一试剂都共用试剂针R1，所有项目的二试剂都共用试剂针R2。试剂针R1或R2在每吸取一次试剂后都会进行一次清洗，之后会 立即吸取下一个项目的试剂。 当自身清洗能力下降，试剂针在吸取试剂时会将部分残留的前项目试剂成分带入到后项 目反应杯中，对后项目的检测结果造成影响。 从各个项目设置的参数可知，试剂体积量远大于样本体积量。因此试剂针携带污染影响程度会高于样本针携带污染。 携带污染实验方案 目前大部分实验室开展的生化检测项目至少都有20项以上，评价全项目之间的携带污染会非常耗时，试剂成本消耗量大。且不同仪器的动作原理不完全相同，设计一个较为简单，合理的实验方法是需要重点考虑的 内容。 试剂针携带污染实验方案原理：通过设置特定的标本检测顺序，每个样本只做一个项目的检测，可以控制不同项目的先后吸取顺序，实现任何一个 项目都能与其他项目相遇。为了有效评价项目之间携带污染影响程度，污染实验所用病人样本的混合血清应尽量包含医学决定水平浓度 试剂针携带污染实验方法 携带污染初实验 假设本次实验以A, B, C, D, E五个项目来考察各个项目之间的试剂针携带污染, 先在生化仪中输入样本测试号码和选择项目，每个样本号码只选择一个项目，目的是使试剂针吸取项目的顺序 完全按照样本测试号码的先后顺序进行，五个项目的测试 顺序见表1。测试完成后，将数据输入到处理表格2和表格3中，按照一定的判断标准，寻找可能存在的污染项目组合。 试剂针携带污染确认实验 由携带污染初实验筛选出怀疑有污染的项目组合， 假设 (A→B) 同(D→E) 即A项目对B项目（A项目做好后紧接着做B项目），D项目对E项目（D项目做好后紧接着做E项目）怀疑有污染。 由于初实验的项目交叉结果只是一次测试的结果， 可能有偶然因素，还必须进行确认实验。 以(A→B)为例，(D→E)的情况相同 先单独做A项目，紧接着连续测试3次B项目，第一个B项目的结果受A项目影响最大，第三个B项目的结果因为有2次自身冲洗，结果应比较准确。比较第一个B项目检测结果同第三个B项目检测结果，如果影响百分比同初试结果影响趋势和程度相近，可以判断 A项目对B项目有携带污染。 确认实验检测顺序以(A→B ）, (D→E)为例 确认实验步骤（表4） A B1 B2 B3 D E1 E2 E3 比色杯污染实验方法 以项目A对B﹑C﹑D﹑E 4个项目比色杯污染 试剂交叉污染---类型 1. 试剂成分间的直接影响 2.试剂成分间的间接影响 3.反应进程相同 4.影响反应条件 试剂交叉污染 1. 试剂成分间的直接影响 前一个测定试剂中直接含有后一个测试试剂所要测定的项目。例如：通常在AMY的R1试剂中含有Ca离子（酶活化剂）,当某样品作AMY和Ca这两个检测项目时，检测的顺序是先检测AMY，接着检测Ca。因吸取过AMY的R1试剂针上可能沾有残留的R1试剂，所以当R1试剂针再吸取Ca试剂时，会引入AMY的R1试剂中含有