《SNT1113-2002-进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白、叶绿素含量的测定方法》.pdfVIP

进出口螺旋藻粉中藻 蓝蛋白、叶绿素含量的测定方法 Method for determination of phycocyanin and chlorophyiis in spirulina powder for import and export SN ／T 1113— 2002 前 言 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国海南出入境检验检疫局负责起草。 本标准主要起草人：张薇君、郝纯彦、李高兰、云昌浩。 本标准系首次发布的检验检疫行业标准。 1 范围 本标准规定了进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白及叶绿素含量检验的抽样、制样和分光光度测定方法。 本标准适用于进出口螺旋藻粉中藻蓝蛋白及叶绿素含量的测定。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用 于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB ／T 16919食用螺旋藻粉 3 抽样和制样 按GB ／T 16919规定的方法执行。 4 测定方法 4.1 藻蓝蛋白含量测定 4.1.1 方法原理 样品用磷酸盐缓冲液溶解，置冰箱中冷冻、融解，使色素蛋白析出，分离后的提取液用分光光度法测定。 4.1.2 试剂 磷酸盐缓冲溶液：将0.1 mol ／L磷酸二氢钾溶液与0.1 mol ／L磷酸氢二钾溶液(45+55，V ／V)混合，溶液pH值为7.0。 4.1.3 仪器设备 4.1.3.1 分光光度计。 4.1.3.2 超声波振荡器。 4.1.3.3 离心机：3 000 r ／min。 4.1.3.4 低温冰箱：-20℃。 4.1.3.5 离心管：50 mL。 4.1.4 样品测定 称取试样0.25 g～0.5 g(精确至0.000 1 g)，用缓冲液(4.1.2)溶解，超声振荡5 min，定容于250 mL容量瓶中，摇匀。将溶液全部转入250 mL广 口塑料瓶，置于-20℃冰箱内冷冻12 h(或放置过夜)，取出解冻，摇匀。取部分溶液于离心管中，在3 000 r ／min转速下离心15 min。取上层清液，1 cm比色皿，在分光光度计上分别测定620 nm、652 nm、562 nm处的吸光度，用缓冲液(4.1.2)做空白。 4.1.5果计算 根据下式(1)、式(2)、式(3)、式(4)计算出试样中藻蓝蛋白的质量分数含量。 X =0.187A — 0.089A … … … … … … … … … … (1) 1 620 652 X =0.196A — 0.041A … … … … … … … … … … (2) 2 652 620 X =0.104A — 0.251X — 0.088X … … … … … … (3) 3 562 1 2 … … … … … … … … … … (4) 式中： X — — 测试液中藻蓝素的含量，单位为毫克每毫升(mg ／mL)； 1 X — — 测试液中异藻蓝素的含量，单位为毫克每毫升(mg ／mL)； 2 X — — 测试液中藻红素的含量，单位为毫克每毫升(rag ／mL)； 3 A— — 相应波长处(6