植物保护专业毕业番茄白粉.docVIP

本科毕业论文 论丈題打 番茄防御酶活性与番茄抗口粉病 相关性研究 学 Bt 草业学院 专 北 植物保护 牛业届别 姓 名 指导教师 职 称 丸学教务处制 年六月 番茄防御酶活性与番茄抗白粉病相关性研究 摘要：植物在病害或者环境胁迫条件下会产生酶促性的保卫性生化反应，酶活性测定表明：未接种番茄幼 苗中，各品种PAL活性无明显变化，接种白粉菌后抗病品种和感病品种的PAL活性均有升高；未接种番茄幼苗 中各品种间酶活性无明显变化，接种白粉菌后抗病品种的POD活性迅速升高，表现出对病菌侵染强烈的应激变 化，而感病品种升高缓慢；未接种番茄幼苗叶片中，各品种间酶活性无显著差异，且都变化趋势不明显；接种 白粉菌后抗病品种的PPO活性迅速升高，表现出对病菌侵染强烈的应激变化，而感病品种升高趋势相对缓慢。 关键词：番茄白粉病；番茄防御酶；抗病性；相关性 番茄制品是世界公认的健康食品，番茄屮富含的番茄红索具有防癌抗癌、延缓衰老功效，并对因运 动引发的哮喘等多种疾病有潜在疗效。2006年,中国出口番茄酱62. 98万吨，出口金额达3. 56亿美元, 出口数量及金额分别增长了 4.74%和18. 83%，番茄已成为我国出口创汇的重要商品之一。近年来，由 于番茄的大而积种卅i, 一些细菌性病害(斑点病、溃疡病、疮痂病、青枯病等)和一些真菌性病害(白 粉病、叶陽病、灰得病、早疫病、晚疫病)的发病和危害逐年加重。其中，番茄白粉病现在己经成为一 种非常严重的世界性真菌病害，特别是在温室生产番茄中尤为严重。番茄白粉病严重影响了番茄的产量 和质量，同时也是喷施杀菌剂最多的一种番茄病害，使得防治成本升高，坏境污染严重。通常发牛在番 茄生长屮示期，主要危害叶片，叶柄和茎等，发病严重时可造成绝产。病害在露地和保护地均可发生, 但以保护地发病重，流行快，损失人。植物在病害或者环境胁迫条件下会产生酶促性的保T性生化反 应，如光合作用先增强后减弱、呼吸作用增强、渗透性减弱羡至消失、形成绿岛然后褪色、形成过敏性 坏死斑等。同时其代谢反应会发生变化，其中最明显的是由超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CTA) 和过氧化物酶(POD)系统催化的保卫性反应的增强。另外，上述反应的代谢产物，如酚类物质和酮类物 质的含量也同时会增加。伴随着呼吸作用的增强，一些与分解代谢和光呼吸有关的酶类的活性也会增强, 这些酚主要有细胞色素氧化酚(AOA),多酚氧化酶(PPO )。上述各酶都与植物抗病性生化反应有着重耍 的关系，因此研究保卫性反应酶类与抗病性的相关性有着重要的意义。 1材料和方法 1」材料 1.1.1白粉菌来源 2008年5月份，采自甘肃省白银市水川镇井口村日光温室番茄白粉菌带冋室内，接种健康感病番 茄品种里格尔87-5植株上扩人繁殖，备用。 1. 2供试品种 根据2007年对64个加工番茄品种对白粉病抗性的田间调杏结果，挑选高抗品种钻石、TOM()629D, 耐病晶种Z00-73、3379,感病品种里格尔87-5和高感品种3144等6个品种,种子均由甘肃省高台中化 番茄制品公司提供。 1 ? 2方法 1.2.1番茄幼苗的培养和接种方法 选用无病种了，种植在装冇灭菌土的塑料营养体中，每品种种50体，每饰6粒。放在温室或培养 室培养，于4~6叶期将发病叶片上的分生抱了扫落或抖落到健康植株叶片上，并保湿48h,每品种接种 35钵(其中15钵用于测定酶活性，20钵用于调查统计发病率和病情指数)，15钵喷清水作对照，并隔 离培养。分别在接种前、接种后0.5d、Id、2d、4d、7d和lOd检测各品种处理和对照的酶活性,并于 病害特征明显后（高感品种发病率达到50%时），调查统计各品种发病率和病情指数。 2. 2酶液提取及活性测定 2. 2. 1 P0D和PPO活性检测方法 实验所需化学试剂：0. 05mol/l磷酸缓冲液（PH为5. 5）； 0. 05mol/l愈创木酚溶液;2%的双氧水 溶液；0. lmol/1的儿茶酚溶液；20%三氯乙酸溶液。实验仪器用：梢密数显恒温水浴锅；梢密酸度计; 分光光度计。 实验步骤：（1）粗酚液的制备，煎取5g叶片，剪碎后放入早置于冰浴中预冷过的研钵中，加入适 量的磷酸缓冲液后研燃成匀浆，将匀浆完全转入离心管中后在3000r/min转速下离心lOmin,上清液转 入25ml容量瓶中,定容后在低温下保存备用。（2） POD活性的测定,取3支试管,依次加入2. 9ml0. 05mol/l的磷酸缓冲液；1512%的H2O2； lml0.05mol/l的愈创木酚溶液，将其中一支试管在沸水中煮 5min为对照。作两组重复实验，检测体系在加入酶液后立即于37°C水浴屮保温1 Smin,然后迅速转入 冰浴中，立即加入2. 0ml20%三氯乙酸溶液终止反应，然后将