抗人球蛋白试验.ppt

抗人球蛋白试验 讲课老师 吴红梅 实验原理 免疫性溶血性贫血患者的血清中或红细胞膜上常有不完全抗体，这种不完全抗体能吸附在红细膜上，使红细胞致敏，但不能使红细胞凝集，能与相应的抗体（抗人球蛋白抗体）发生特异的抗原抗体结合反应，使致敏红细胞发生凝集。抗人球蛋白试验用于检测不完全抗体，有直接法和间接法两种，直接法是检测患者红细膜表面的不完全抗体，间接法用于检测患者血清中不完全抗体。 实验材料 受检红细胞。 对照同型混合红细胞悬液 阳性对照红细胞悬液。 抗人球蛋白血清。 抗D血清。 受检者血清。 AB型血清。 0.85%生理盐水。 离心机、水浴箱（37℃）、吸管、试管。 实验操作 直接试验 受检者红细胞悬液：取患者抗凝血去纤维蛋白血，离心除上清液，用生理盐水洗涤3次，配成10%红细胞悬液。 正常“O”型抗凝血，离心除去上清液，每次用5ml生理盐水洗涤红细胞3次，然后配成10%红细胞悬液。 实验操作 阳性对照红细胞悬液的制备：取经洗涤的混合O型红细胞（离心后）1滴，加抗D血清2滴混匀，置37℃水浴1h。离心后弃去上清液，再用生理盐水洗涤3次，配成10%红细胞悬液。 取试管4支，编号按下表进行操作。 混匀后置室温5min后观察。或低速离心（1000rpm/min,1min）轻轻混和。 实验操作 间接试验 将混合O型Rh阳性红细胞用生理盐水洗涤1次，配成5%红细胞生理盐水