厄罗替尼对含不同egfr变异的人肺癌细胞以及基质细胞的抑制实验研究分析肿瘤学;肿瘤内科学专业论文.docxVIP

中国医科大学研究生学位论文独创性声明一删本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 中国医科大学研究生学位论文独创性声明一删 本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及 取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论 文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或 其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。 论文作者签名：叁蝉舅L日期：丝监金幺 中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书 本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在 攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学。本人保证毕业离 校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学，且导师 为通讯作者，通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国 家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学 校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，以采用影印、缩 印或其他手段保存论文。 论文作者签名：翅复 指导教师签名：二鞋奎喹 日 期：猃型．妄：名 目 目 录 一、摘 要 中文论著摘要 1 英文论著摘要 3 二、英文缩略语 5 三、论文 前言日U舌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 6 材料与方法 7 实验结果 ． ．．14 讨论和结论 19 四、本研究创新性自我评价 22 五、参考文献 23 六、附录 综jl盎．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．：16 在学期间科研成绩 36 致谢 37 个人简介 38 ·中文论著摘要·厄罗替尼对含不同EGFR变异的人肺癌细胞以及 ·中文论著摘要· 厄罗替尼对含不同EGFR变异的人肺癌细胞以及 基质细胞的抑制实验研究 背景与目的 肺癌是世界上癌症致死的首要原因，其中非小细胞肺癌(non—small cell lung cancer，NSCLC)占肺癌的80％左右。即便采用新一代含铂两药联合化疗，晚期NSCLC 患者的中位生存期也只有8-10个月左右。EGFR-TKI让人们在肺癌治疗方面看到 了曙光，但仍有25％一30％的携带EGFR活化突变NSCLC患者对EGFR-TKIs原发耐 药。此外，几乎所有含EGFR突变且对吉非替尼或厄洛替尼治疗有效的NSCLC患者 最终仍会产生继发耐药[5]。 因此，了解这类靶向药物的耐药机制对如何克服耐 药或耐药后如何选择治疗就显得尤为重要。HGF是除EGFRT790M突变和MET扩增 外又一种涉及到原发性及继发性耐药的分子机制。本实验旨在明确各种类型肺癌 细胞及肿瘤微环境中的基质细胞在EGFR—TKI作用下其细胞生长抑制情况以及宿 主微环境中各种生长因子(如HGF、TGF—a、IGFl和EGF)的表达变化，为后续开 展EGFR耐药机制研究提供前期理论依据。 方法 1．应用MTT法测定EGFR敏感突变型肺癌细胞PC9的厄洛替尼的耐药指数 IC50。 2．应用ELISA法检测单独培养细胞(EGFR敏感突变型肺癌细胞PC9、EGFR 耐药突变型肺癌细胞H1975、EGFR野生型肺癌细胞A549、肿瘤基质细胞MRC5)上 清液中HGF、TGF-a、IGFl和EGF在加或不加厄洛替尼(浓度为方法1中所测IC50) 情况下的表达含量。 结 果 1．MTT法实验结果显示，PC9细胞对厄洛替尼敏感，与对照组(不加药组)相 比，随着厄洛替尼浓度增加，PC9细胞生长抑制率也相应提高，呈剂量依赖性。 最终实验测得IC50为3．331unol，PO．01，与对照组差异有统计学意义。2．加入厄洛替尼后，A549／PC9／MRC一5细胞上清中TGF-Q含量均增加，有统 最终实验测得IC50为3．331unol，PO．01，与对照组差异有统计学意义。 2．加入厄洛替尼后，A549／PC9／MRC一5细胞上清中TGF-Q含量均增加，有统 计学意义；H1975细胞上清中TGF-a含量下降，且无统计学意义。 3．加入厄洛替尼后，H1975／PC9两组细胞上清中表达IGF-1增加，前者无统 计学意义；A549／MRC-5两组细胞在加药后上清中表达的IGF-I减少，且有统计学 意义。 4．加入厄洛替尼后，H1975细胞、A549细胞、PC-9细胞及MRC-5细胞，表 达EGF含量