脑胶质瘤治疗新发现CSFr1受体阻断对巨噬细胞及肿瘤微环境的影响.docVIP

脑胶质瘤治疗新发现-CSFr-1受体阻断对巨噬 细胞及肿瘤微环境的影响 GMB包含多种亚型，包括神经母胶质肿瘤。大多数胶质细胞治疗手段。新的治疗手段作 用于胶质肿瘤细胞微环境，例如肿瘤相关巨噬细胞和小胶质细胞TAMSo巨噬细胞依赖于 CSF1分化和生存。我们运用CSFlr抑制剂作用于鼠神经源性胶质细胞模型，我们发现可 以增加生存率及抑制肿瘤细胞成熟。CSFlr阻滞减缓了病人来源的异种移植颅内胶质细胞 的生长。令人意外的是，治疗后老鼠体内，TAMS在治疗后并不减少，在CSFlr抑制的环 境中胶质细胞分泌的GM-CSF及INF-v帮助了 TAMs的存活，活化的M2表达在存活的 TAMs中升高，这与肿瘤细胞受损的表现相似。这种基因表达与胶质瘤病人的生存率提高 有关。我们的结果证实TAMs是一个治疗神经源胶质瘤的潜在治疗靶点，并证实了 tams 在csflr抑制时对GMB的转变。 GMB是一种恶性程度高，预后差，对外壳治疗及放化疗不敏感的基本。他的大量异常通 路激活导致的的及大量肿瘤细胞的和基因的多样性，是治疗的难点。这种多样性GBM有 多中分子型，神经母型、间充质性、神经性、传统型。与之相比，在肿瘤微环境中的非肿 瘤细胞是稳定的治疗靶点。在很多种肿瘤中TAMs表达与肿瘤恶性度高预后差有关。CSF- 1依赖性efg信号业余乳腺癌和胶质瘤有关。 在小鼠癌症模型中，一些手段可以就是消除或抑制TAMs , 一个就是CSFlr抑制，可以消 耗巨噬细胞并且在很多异种移植肿瘤西行中可以缩小肿瘤。我们使用强效选择性的CSF-1 抑制剂作用于非临床的GBM模型，包括RCAS-hPDGFB阴性;Cdkn2a基因丄 和来源于病人的颅内异体接种的神经母性GBM细胞系的肿瘤球。我们发现 CSF-1抑制了胶质瘤的生长机制并不是TAMs的消耗而是胶质瘤微环境对其的“再教育 PDG鼠模型中，可以特定致癌基因传递的RCAS病毒受体有表达，PDGFB。PDG肿瘤包含 了人类神经母胶质瘤的生理学和分子学的特性。我们首先研究了zaiPDGGBM中是否像人 类一样有大量巨噬细胞聚集。我们确认,大量CDllb阳性骨髓细胞和巨噬细胞在PDG GBMs中大量表达,与正常脑相比。在PDG中MRNA中Cd68,CSFlr的表达升高(Fia.la.b ) 胶质瘤细胞和Tams表达CSF1 ,单CSF1受体仅表达于巨噬细胞中。 BLZ945是颅内CSFlr的抑制剂，他对CSFM的IC50是InM ,高于其他酶活性3200倍。对 空白组老鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs ) BLZ945可以移植CSF1依赖的分化。 EC50=67nMo而且可以减少CSFlr的磷酸化,与CSFlr的特异性抗体相同。BLZ945同样可 以可以减低CRL?2467BMDMs ( PDG鼠来源)和NOD-SCID鼠来源的BMDMs的活性。但是, BLZ945对于PDG肿瘤细胞系(CSFlr阴性)和U87 (人来源肿瘤细胞)的增值和PDG肿 瘤球的形成并没有作用(Fig.l d.Fig.3d-g )因此,BLZ945没有直接作用于对胶质瘤细胞, 而是通过抑制CSFlr扰乱巨噬细胞。 CSF-lr抑制阻断了胶质瘤的进行提高存活率 接下来我们将BLZ用于PDG鼠,肿瘤接种2.5周后,30%的动物出现小的肿瘤店\\级,70%的 没有肿瘤(通过MRI)(Fig.4ab)我们用BLZ945治疗小鼠并评估期无症状存活?glej载体组中 位存活时间是5.7周与之相比,BLZ945治疗提高了长期生存率,64.3%的小鼠活到了26周, 实验终点.我们选择这个时间作为实验终点，因为Cdkna缺乏鼠在三十周出现自发的肿 瘤.BLZ945在实验中并未出现明显的副作用?g4e)与以前的病理学结果相符.载体组组织学 分型全部是高恶性肿瘤,与之相比BLZ945恶性度低,并且有55.6%的动物并没有发现症状。 (figig。fig , 4cdf ) 接下来我们检测BLZ945对PDGs的作用，其在组织诊断上和GBM拥有相同的特性。的我 们进行了一项7天的包含MRI检测肿瘤初始大小和其发展的实验。(fig2a )我们将患有 肿瘤的大鼠所及分组进行b\z945和载体的治疗。载体治疗组,肿瘤増大,相比较,blz945 组肿瘤停止增大,并且大多数肿瘤变小(fig 2bde Fig 5a.b )随后我们研究了第三组肿瘤大 于40mm的用blz945治疗，大多数成年鼠发生了退化。(fig2cde fig5c )载体组不能比较， 因为大多数不能活到实验结束。我们确认CSFJr的磷酸化在所有鼠中被抑制，并且不影 响胶质细胞产生的hPGDF-B 由于我们使用的是PDGF驱动的模型,我们想拍岀BLZ945对假体刘PDGN信号的脱靶作 用。胶质瘤表达PDGFR-a ,