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柚子皮中的总黄酮提取工艺研究 　　摘要：以乙醇作为浸提剂，利用响应曲面法探讨柚子皮总黄酮的最佳提取工艺条件。结果表明，提取温度为70 ℃，液料比为20∶1、乙醇体积分数为80%、提取时间为 h，所得的柚子皮中的总黄酮含量最高，为%。　　关键词：柚子皮；响应曲面法；总黄酮；提取工艺　　中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：0439--0104-05　　DOI：/　　Abstract： The optimum extracting parameters were investigated with response surface methodology with alcohol as the extraction agent. The results showed that the extracting rate of total flavonoids reached % at the optimal processing conditions when extraction temperature was 70 ℃，the ratio of extractant to material was 20∶1，volume percent of alcohol was 80%，and extraction time was h.　　Key words： pommel peel；response surface methodology；total flavonoids；extract process　　?S酮类化合物是一类具有C6C3C6骨架的2-苯基色原酮或色原烷的衍生物[1]。柚子皮中含有丰富的黄酮类物质，通常在植物中与糖结合成苷，主要由柚皮苷、橙皮苷、柚皮素芸香苷等二氢黄酮类化合物构成，其中柚皮苷含量占80%以上[2]。黄酮类化合物具有多种生物活性和药用价值，如抗氧化、抗肿瘤、消炎、镇痛、抗菌、降低血液黏度、减少血脂和血栓的形成、防治胃溃疡等[3-6]。在食品工业上，可作为天然的食品添加剂、食用色素、风味改良剂和苦味剂[7]，又可合成高甜度、无毒、低能量的柚皮苷二氢查尔酮和新橙皮甙二氢查尔酮。此外，柚皮苷还可以用作合成柠檬素、鼠李糖等具有较高的药用价值的原材料[8]。长期以来，柚子主要用来鲜食，而占柚果总重量高达20%～30%的果皮，大多数作为废物被丢弃，既浪费资源又污染环境。从柚子皮中提取黄酮类物质可以有效开发利用柚子资源，对提高柚子产业的附加值具有重要意义。本研究应用乙醇浸提法，通过单因素试验和响应面优化，得出了柚子皮总黄酮提取的最佳工艺参数，以期为柚子产业开发提供参考。　　1 材料与方法　　 材料与仪器　　 材料与试剂 马家柚，由江西瀛洲农业科技发展有限公司提供。芦丁标准品，乙醇、甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、三氯甲烷，均购自广州齐云化学试剂有限公司。　　 仪器与设备 HH-4型数显恒温水浴锅；722 N型可见分光光度计；SHZ-CB型循环水式多用真空泵；JJ200 B型电子天平；RV 10型旋转蒸发器。　　 方法　　 芦丁标准曲线的绘制 精密称取芦丁标准品 mg，加甲醇溶解并定容100 mL，得到浓度为150 μg/mL的芦丁标准溶液。分别准确吸取芦丁标准溶液0、、、、、 mL移入10 mL具塞刻度试管中，先加30%乙醇溶液至5 mL，再加入5%NaNO2溶液 mL，摇匀后静置6 min，加入10%Al3溶液 mL，摇匀后静置6 min，再加入 mol/L NaOH溶液2 mL，再用30%乙醇溶液定容至刻度，充分振荡后放置30 min。以30%乙醇为空白，用1 cm比色杯在波长510 nm下测定吸光度[9]。　　 黄酮类物质的提取 将柚子清洗除杂后，剥取其果皮，柚子皮经过挑选清洗，切割成1 cm2的小块，置于70 ℃的烘箱中干燥10 h，用小型高速粉碎机将其粉碎过100目筛。精确称取 g制备好的柚皮粉，置于锥形瓶中。按照张怡等[10]的方法提取后作为待测液。　　 总黄酮的检测 用移液管吸取1 mL待测液，按标准曲线指标操作步骤于波长510 nm处进行吸光度测定。通过吸光度的测定，根据以下公式算出样品中总黄酮提取率[10]。重复3次，取平均值。　　总黄酮提取率：X=×10-6。式中，M1为依据标准曲线计算出被测液中总黄酮的含量；M为试样的质量；V1为待测液分取的体积；V2为待测液的总体积。　　 单因素试验　　1）提取温度的选择。固定液料比为20∶1，乙醇体积分数为70%，提取时间为2 h的提取条件下，在提取温度为60、70、80、90、100 ℃时，测定柚子皮中的总黄酮提取率。　　2）液料比的选择。固定提取温度为70 ℃，乙醇体积分数为70%，提取时间为2 h的提取条件下，液料