紫外吸收光谱-荧光光谱分析.ppt

* 例： 维生素B12的含量测定精密吸取B12注射液2.50mL，加水 稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度以及标示量的百分含量（该B12注射液的标示量为100μg / mL） 1）对照法 * 2）吸光系数法 * （二）多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 * 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Ca * 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 （3）系数倍率法 * 1．解线性方程组法 步骤： * 2．等吸收双波长法 步骤： 消除a的影响测b * 消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 * 3．系数倍率法 前提：干扰组分b不成峰形 无等吸收点 * 步骤：b曲线上任找一点→λ1 ， 另一点→λ2 优点：同时将待测组分和干扰组分放大信号K倍， 提高了待测组分测定灵敏度 a b * 例1．取咖啡酸，在165℃干燥至恒重，精密称取10.00mg，加少量乙醇溶解，转移至200mL容量瓶中，加水至刻度线，取此溶 液5.00mL，置于50mL容量瓶中，加6mol/L的HCL 4mL，加水至刻度线。取此溶液于1cm比色池中，在323nm处测定吸光度为0.463，已知该波长处的 ，求咖啡酸百分含量。 解： 1、双光束分光光度计与单光束分光光度计相比，其突出优点是 ( ) (1) 可以扩大波长的应用范围 (2) 可以采用快速响应的检测系统 (3) 可以抵消吸收池所带来的误差 (4) 可以抵消因光源的变化而产生的误差 2、在紫外光谱中，?max 最大的化合物是 ( ) 1、双光束分光光度计与单光束分光光度计相比，其突出优点是 ( ) (1) 可以扩大波长的应用范围 (2) 可以采用快速响应的检测系统 (3) 可以抵消吸收池所带来的误差 (4) 可以抵消因光源的变化而产生的误差 2、在紫外光谱中，?max 最大的化合物是 ( ) 1、双光束分光光度计与单光束分光光度计相比，其突出优点是 ( ) (1) 可以扩大波长的应用范围 (2) 可以采用快速响应的检测系统 (3) 可以抵消吸收池所带来的误差 (4) 可以抵消因光源的变化而产生的误差 2、在紫外光谱中，?max 最大的化合物是 ( ) 3、一化合物溶解在己烷中,其 =305 nm，而在乙醇中时， =307nm，引起该吸收的电子跃迁类型是 ( ) (1) ?→? * (2)n→? * (3) ?→? * (4) n→? * 4、双波长分光光度计的输出信号是 ( ) (1) 试样吸收与参比吸收之差 (2) 试样在 ?1和 ?2处吸收之差 (3) 试样在 ?1和 ?2处吸收之和 (4) 试样在 ?1的吸收与参比在 ?2的吸收之差 5、物质的颜色是由于选择性地吸收了白光中的某些波长所致， CuSO4 溶液呈蓝色是由于它吸收了白光中的 （ ） (1) 蓝色光 (2) 绿色光 (3) 黄色光 (4) 红色光 6、分子中各种电子能级高低顺序为______________________________, 在大多数有机化合物分子中,价电子是处在_________的各个轨道中的,一般 紫外-可见吸收光谱分析中最有用的 二种电子 能级的跃迁是__________、 ___________跃迁。 3、一化合物溶解在己烷中,其 =305 nm，而在乙醇中时， =307nm，引起该吸收的电子跃迁类型是 ( ) (1) ?→? * (2)n→? *