苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因序列恒温扩增核酸试纸条检测试剂.PDFVIP

杭州优思达生物技术有限公司 BT 基因恒温扩增核酸试纸条检测试剂盒说明书 苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因序列恒温扩增核酸试纸条检测试剂盒说明书 【产品名称】苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因序列恒温扩增核酸试纸条检测试剂盒 Bacillus thuingiensis （BT）gene Isothermal Amplification Diagnostic Kit 【英文名称】 【包装规格】单管单人份，20人份/盒。 【预期用途】用于苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因序列的快速筛查和检测。仅供科研用。 【检验原理】本试剂盒将DNA扩增、核酸杂交和核酸试纸条检测三种技术有机地融为一体，在恒温扩增反应液中加入两对苏云 金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因序列特异性引物和一对特异性探针，一次性完成DNA 扩增及杂交过程，然后用一次 性核酸检测装置（3号）对苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白基因序列进行定性检测。由于待测样本的扩增（PCR管 盖和石蜡油双重保护）和检测过程均在物理封闭条件下完成，所以本试剂盒具有防止实验室扩增物交叉污染，防 止假阳性的效果。 【试剂盒组成】 1 试剂盒 A 编号 试剂盒组成 体积 数量 1 恒温扩增反应液* 10μl 20管 2 ddH2O 180μl 1管 *装有恒温扩增反应液的反应管中包括除样本外的所有试剂。上覆 3 阳性对照 40μl 1管 矿物油，以防止扩增中产生气溶胶，防止假阳性。 4 说明书 - 1份 2 试剂盒 B 编 号 试剂盒组成 体积 数量 1 一次性核酸检测装置 (3号) - 20份 2 色卡 - 1份 3 备用液泡 - 2颗 4 装置操作说明书 - 1份 【储运条件及有效期】 1.运输条件：试剂盒 A 需要-20℃冷冻运输，运输过程中，试剂盒 A 在-20℃-0℃内保存时间不超过五天；试剂盒 B 可以 常温运输。 2.储存条件：试剂盒A在-20℃保存；试剂盒B在2℃-30℃干燥保存。 3.有效期：有效期12个月 【仪器要求】任何恒温装置，如：水浴锅、金属浴、普通PCR仪等。 【操作步骤】 1. 样本处理及 DNA 提取 未提供 2. 恒温扩增 2.1 根据需要确定所需反应液的管数(待测样本数n+阳性对照+阴性对照)，然后从试剂盒中取出反应管并做上标记； 2.2 待反应液解冻后，以4000rpm的转速离心3-5秒； 2.3 在任何样本被加入之前，首先在反应液中直接加入10μlddH2O，用移液器吹打混匀，作为阴性对照； 2.4 在标记好的反应管中，依次加入 6μl ddH2O 和 4μl 处理好的样本或阳性对照（试剂盒中提供），并用移液器吹打混 匀 （阳性对照应在所有样品和阴性对照之后被加入）； 2.5 加好样的反应管再以4000rpm的转速离心3-5秒。 2.6 将离心后的反应管放置恒温仪上，55℃反应45min。 3 检测 （如图1） 3.1 将上述扩增后的反应管(不可开盖，以避免污染)放入固定盒（内芯）中（检查液泡有无漏液以及是否在图 1 所示位置， 若 漏液或不在图 1 所示位置则按[注意事项 6]进行处理），合上固定盒后将其装入装置外盒；