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天津医药2015年8月第43卷第8期 871 白细胞介素-1β对大鼠软骨细胞MMP-13表达的影响及 miR-27b的调控作用 1，2 1 王欣 ，秦宇 摘要：目的 观察白细胞介素（IL）-1β对大鼠软骨细胞基质金属蛋白酶（MMP）-13表达的影响及miR-27b 的调 控作用。方法 雄性Wistar大鼠7只提取软骨细胞。Westernblot检测IL-1β刺激软骨细胞0h、24h、48h各时间点 MMP-13表达变化；miRNAs微阵列分析48h 内软骨细胞差异表达的miRNAs；Real-timePCR定量分析筛选出下调 最为明显的miRNAs；荧光素酶报告基因实验验证miR-27b与MMP-13的靶定调控关系。结果 IL-1β刺激软骨细 胞后，MMP-13蛋白在0h、24h、48h各时间点表达逐渐增加（P0.05）；miRNAs微阵列分析发现48h 内软骨细胞 有36个miRNAs 出现表达变化，变化最为明显的有6个，分别为miR-27b、miR-31、miR-26a、miR-26b、miR-23、 miR-204；Real-timePCR显示miR-27b下调最为明显；miR-27b拟似物和荧光素酶表达质粒共转染软骨细胞后，荧 光素酶活性受到明显抑制（P0.05）。结论 IL-1β刺激软骨细胞后，出现miR-27b 的表达下调和MMP-13蛋白的 表达上调，miR-27b与MMP-13存在靶定调控关系。 关键词：软骨细胞；基质金属蛋白酶 13；微RNAs；白细胞介素1β；微阵列分析；微小RNA-27b 中图分类号：R349.5 文献标志码：A DOI：10.11958/j.issn.0253-9896.2015.08.011 Effectsofinterleukin-1βonMMP-13expressioninratchondrocytesand itsregulationofmiR-27b 1,2 1 WANGXin ,QINYu 1TianjinMedicalUniversity,Tianjin300070,China;2DepartmentofOrthopedics,TianjinHarborHospital Abstract：Objective Toobservetheeffectofinterleukin-1β(IL-1β)onexpressionofMatrixMetalloproteinases 13 (MMP-13)inratchondrocytesanditsregulationofmiR-27b.Methods Chondrocyteswereextractedfrom7Wistarmale rats.ExpressionofMMP-13wereexaminedbyWesternblotat0h,24h,48hafterIL-1βstimulation.DifferentialmiRNAs expressionprofileswereexaminedbymiRNAsmicroarray.Themostobviouslydown-regulatedmiRNAswereconfirmedby quantitativeReal-timePCR.TargetedregulationrelationshipbetweenmiR-27bandMMP-13wassetupbyLuciferasere⁃