用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯片构建及培养条件.pdf

中国药理学通报　ＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌＢｕｌｌｅｔｉｎ　２０１６Ａｐｒ；３２（４）：５８１～５ ·５８１· 网络出版时间：２０１６－３－１８１１：２２　网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ１１２２．０５４．ｈｔｍｌ ◇实验方法学◇ 用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯片构建及培养条件研究 １ １，２，３ １，２，３ １，２，３ 徐为峰 ，王　帅 ，孟宪生 ，包永睿 （１．辽宁中医药大学药学院，辽宁大连　１１６６００；２．辽宁省组分中药工程技术研究中心，辽宁沈阳　１１００３２； ３．辽宁省现代中药研究工程实验室，辽宁大连　１１６６００） ［６］ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０１６．０４．０２７ 在人体内的生长状态，Ｋｅｉｒａｎ等 研究发现，肿瘤细胞在二 文献标志码：Ａ 文章编号：１００１－１９７８（２０１６）０４－０５８１－０５ 维与三维条件下ＲＮＡ水平已出现数百个片段的差异。张旭 ［７］ 中国图书分类号：Ｒ３２９２４；Ｒ３４３３；Ｒ７３３；Ｒ７３５７ 朗等 通过构建体外微囊化肿瘤细胞三维模型研究发现，抗 ［８］ 摘要：目的　设计制作用于肿瘤细胞三维培养的微流控芯 癌药物对微囊化乳腺癌细胞球的抑制率降低。刘劲松 的 片，以海藻酸钙凝胶为细胞支架，基于芯片研究适合的凝胶 实验表明，三维培养的肝肿瘤细胞纤维蛋白骨架发生重排， 形成、溶解条件，利用该条件长期培养ＳＭＭＣ７７２１细胞并检 结构与在体肝组织更接近。此外，三维培养下的细胞微环 测其活力。方法　利用 ＣＤＲ软件、软光刻技术、模塑法、等 境、细胞间及细胞与基质间的相互作用能明显影响分泌、黏 ［９］ 离子键合法等设计并制作出微流控芯片并验证其适用性；在 附、侵袭和转移等细胞功能 。因此，有必要将微流控技术 芯片中三维培养肝肿瘤细胞ＳＭＭＣ７７２１，观察细胞形态，以 与肿瘤细胞的三维培养结合，在更接近真实状态下进行实验 ＩＰＰ软件辅助计算细胞在７２ｈ的存活率。结果　设计制作 研究。本实验设计了一种可以实现细胞三维培养的芯片结 构，以大分子生物多糖海藻酸钠（ＣＨＮａＯ）ｘ和氯化钙形 的微流控芯片适合于肿瘤细胞三维培养；芯片中培养的肝癌 ６ ７ ６ 细胞７２ｈ内生长状态良好，存活率达（９６１±４５）％，细胞 成的无毒、透明、生物相容性好、持水能力强的海藻酸钙凝胶 堆积排列紧密，出现肿瘤细胞聚集体（ｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓｐｈｅｒｏｉｄ， 为三维骨架［１０－１１］，对人肝癌细胞 ＳＭＭＣ７７２１进行长期培 ＴＣＳ）。结论　该文设计构建用于肿瘤细胞三维培养的微流 养。为基于微流控技术在细胞水平进行的肿瘤药理学研究 控芯片，并用于肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１培养，细胞生长状态良 提供了新的模式。 好，且细胞生长与聚集状态表现出一定特殊性。利用该芯片 １　材料与方法 进行肿瘤细胞三维培养，可以为肿瘤细胞生长状态研究及抗 １．１　细胞悬液的制备　人肝癌ＳＭＭＣ７７２１细胞，购于昆明