甜柿休眠芽茎尖包埋－玻璃化法超低温保存及植株-中国科技论文在线.PDFVIP

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2019-03-02 发布于天津
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甜柿休眠芽茎尖包埋－玻璃化法超低温保存及植株-中国科技论文在线.PDF

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甜柿休眠芽茎尖包埋-玻璃化法超低温保存及植株再生张永卓，罗正荣（华中农业大学林学学院/ 园艺园艺植物生物学教育部重点实验室，武汉 430070 ）摘要：主要探讨蔗糖浓度、装载时间和PVS2 处理时间对部分中国甜柿种质超低温保存后成活率的影响。结果表明，长约1 mm 的柿休眠芽茎尖用海藻酸钙包埋后，在含有0.3 mol·L-1 蔗糖的改良MS 培养基（KNO 和NH NO 3 4 3 减半）上预培养1 d，室温（25℃）下PVS2 处理2 h 后快速投入液氮（LN ），1 h 后取出，在40℃水浴中化冻1～ 2 min ，用含有1.2 mol·L-1 蔗糖的改良MS 培养液洗涤20 min ，接种于含ZT （玉米素）2.2 mg·L-1、PVP （聚乙烯吡咯烷酮）600 mg·L-1 的改良MS 培养基，暗培养3～5 d，转移至正常光下，最高成活率接近100%；再生植株生长和分化正常。关键词：甜柿；休眠芽茎尖；包埋-玻璃化法；超低温保存 Cryopreservation of Dormant Shoot Tips of Non-Astringent Types of Chinese Persimmon by Encapsulation-Vitrification and Plantlets Regeneration ZHANG Yong-zhuo, LUO Zheng-rong (Key Laboratory of Horticultural Plant Biology, Ministry of Eolucation/College of Horticulture and Forestry, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070) Abstract: Shoot tips excised from dormant axillary buds of non-astringent types of Chinese persimmon （Diospyros kaki Thunb.）, which is originated from China, had been cryopreserved by encapsulation-vitrification for the first time. In the experiment, three factors, namely sucrose concentration, loading time and exposure time to PVS ,were considered and a good protocol was 2 achieved. Excised shoot tips were encapsulated into alginated-gel beads. Then alginate-coated shoot t