植物生长素通过ABP1促进细胞膜泡的外排运输-中国细胞生物学学报.PDF

网络出版时间：2014-08-25 14:08 网络出版地址：/kcms/doi/10.11844/cjcb.2014.09.0081.html 中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2014, 36(9): DOI: 10.11844/cj cb.2014.09.0081 植物生长素通过ABP1促进细胞膜泡的外排运输 柳 叶 王亚红 黄 妤 陈宗星 赵 燕 张学文* (湖南农业大学生物科学技术学院, 长沙4 10128) 摘要 为了研究植物生长素结合蛋白ABP 1(auxin binding protein 1)对膜泡运输的调控, 将烟草 ABP1 生长素结合蛋白基因 cDNA分别构建成可诱导型表达的过表达和干扰表达载体, 并将绿色荧 光蛋白GFP对烟草分泌载体膜蛋白SCAMP2(secretory carrier membrane protein 2)融合进行了细胞的 膜泡标记, 转化植物模式细胞BY-2后分别获得了转ABP 1和antiABP 1的两类膜泡标记转基因细胞系。 以雌二醇诱导ABP 1、antiABP 1表达后, 结合生长素处理, 通过扫描激光共聚焦观察了细胞的膜泡运 输变化。当诱导ABP 1在细胞内过量表达后, 以吲哚-3- 乙酸(indole-3-acetic acid, IAA)处理细胞, 在细 胞核膜及周围内质网膜、细胞质膜以及其它细胞内膜系统, 都观察到强烈荧光信号, 说明细胞内膜 泡运输更为活跃; 当诱导antiABP 1在细胞内干扰表达时, 在细胞核附近维持有较强烈的荧光信号, 而 细胞质膜及两细胞间隔的荧光信号明显减弱, 表明抑制ABP 1表达显著抑制细胞膜泡的外排运输。 在ABP 1经诱导过表达后, 加入IAA处理细胞, 在0~6 min 时间段内间隔性观察了细胞膜泡对生长素的 时间响应, 在这段时间内细胞核周围及内膜系统的荧光信号明显增强, 细胞质膜的荧光强度没有明 显的变化, 表明细胞核与内膜系统间存在活跃的膜泡运输, 内膜系统向细胞质膜间的外排膜泡运输 也逐渐加强。因此, 可以证明ABP 1参与生长素信号响应, 增强细胞膜泡的外排运输。 关键词 生长素; 生长素结合蛋白ABP 1; 膜泡运输 ABP1 Mediates Auxin Accelerating of Vesicular Exocytosis in Plant Liu Ye, Wang Yahong, Huang Yu, Chen Zongxing, Zhao Yan, Zhang Xuewen* (College of Bioscience and Biotechnology, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, China) Abstract In order to investigate the auxin regulation of vesicular transport in plant cell, we cloned the tobacco auxin binding protein gene (ABP1) cDNA and recombined it into an inducible Ti vector pER16 in either sense or antisense direction. The vesicles labeled BY-