摇蚊幼虫多线染色体制备与显微观察.PDF

摇蚊多线染色体的制备及显微观察摇蚊多线染色体的制备及显微观察 摇蚊多线染色体的制备及显微观察摇蚊多线染色体的制备及显微观察 ♦实验报告要求 ♦摘要 （100-150字） ♦关键词 （3-5个） ♦前言 ♦实验材料和方法 ♦实验结果 ♦分析讨论 ♦ 参考文献 实验目的和要求 1、掌握多线染色体的制片技术。 2、观察多线染色体形态特点。 3、了解多线染色体形成的机制。 实验材料 摇蚊幼虫 摇蚊是双翅目昆 虫，生命周期中需 要经过变态过程。 蚊幼虫是一种红色 小虫 （鱼饵料）， 栖身于流水的浅沟、 池塘及稻田的泥沙 中，以水中的植物 腐殖质为食。 多线染色体发现及特点 意大利细胞学家Balbiani于1881年首先发现了摇蚊多 线染色体 （polytene）。 双翅目昆虫的消化道细胞 （从唾腺一直到直肠）发育 到一定阶段后不再进行有丝分裂，而是停止在细胞分 裂间期。随着幼虫整体器官以及这些细胞本身体积的 增大，细胞核染色体仍不断地进行自我复制，而且彼 此不分开，大约有1000-4000条染色丝的复制形成为一 米巨大染色体，尤其唾液腺细胞更为明显。因此，从 这些间期细胞中制备的染色体称为多线染色体。 多线染色体发现及特点 1.体积巨大，比其它 体细胞染色体长100- 200倍，体积大1000- 2000倍。 多线染色体发现及特点多线染色体发现及特点 多线染色体发现及特点多线染色体发现及特点 2.多线性，每条多线 染色体由500-4000条 解旋的染色体合并在 一起形成。 摇蚊多线染色体的制备及其斑 带和泡的观察 3.体细胞联会，同源 染色体紧密配对，并 合并成一个染色体。 多线染色体发现及特点多线染色体发现及特点 多线染色体发现及特点多线染色体发现及特点 4.斑带纹，染色后呈现出 明暗相间的带纹。 多线染色体发现及特点多线染色体发现及特点 多线染色体发现及特点多线染色体发现及特点 5.5.膨松区,在幼虫 5.5. 发育的某个阶 段，某些基因进 行转录，其所在 区域的染色质松 弛，表现为细胞 水平上多线染色 体的相应带区疏 松膨大，形成所 谓“泡”状形态。 斑带：斑带被认为是染色小粒横向排列而成的。 横纹是详细研究染色体的部分缺失、倒位、重 复、反复、易位等现象的标记。 摇蚊多线染色体上的 “泡”的疏松区域在显微 水平很容易观察到，并且这些“泡” 与个体发 育过程中基因的活性、转录有关。 实验用品与试剂 ♦生理盐水 ♦蒸馏水 ♦苯酚品红 摇蚊多线染色体的制备及其斑带 和泡的观察——实验步骤 ♦摘取唾腺 ♦ 充分洗涤，染色液染色20分钟 ♦压片 ♦观察结果 唾腺的摘取 用镊子将夹取一只摇蚊幼 虫放在载玻片上，滴加一 滴生理盐水，用一根解剖 针压在幼虫的前部，用另 一根解剖针拉开虫体头 部，使其与虫体分开，消 化道前部即随头部被带出。 分离两个手套型的囊状唾 腺供实验使用，虫体其余 部分去除干净。 剥离唾腺 解离唾腺细胞 洗涤后染色 加盖玻片 用滤纸吸去多余染液 轻轻按压 显微镜下观察多线染色体形态 普通显微镜的结构 Nikon 双目光学显微镜结构双目光学显微镜结构 双目光学显微镜结构双目光学显微镜结构 思考题 1.多线染色体是如何形成的?含有多线染色体的 细胞处于什么细胞周期？ 2.多线染色体的“斑带”是如何形成的？ 其“泡” 的结构与基因转录有何关系？ 3.为什么一个细胞中多线染色体的数量为nn而不 nn 是2n2n？