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第24卷第9期 中国现代医学杂志 V01.24No.9
ofModernMedicine Mat.2014
2014年3月 ChinaJournal
文章编号:1005-8982(2014)09-0001—06
·论著·
细胞CD47基因沉默效应鉴定冰
高树峰,张少容,徐 莲,李 黎,杨春平,刘建国,汪关群,刘红兵,刘月辉
(南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科,江西南昌330006)
法设计CD47靶点特异性的寡核苷酸序列,利用酶切反应合成含特异性系列线性化的pGCSIL—GFP载体,
阳性克隆PCR及测
B10tting检测重组慢病毒对CD47靶基因在mRNA和蛋白水平上的沉默抑制情况。结果
序证实针对CD47基因shRNA慢病毒干扰载体构建成功,RT—PCR及WesternBlotting检测载体在rnRNA
和蛋白水平上可抑制喉癌Hep一2细胞的CD47表达。结论成功构建针对CD47基因的慢病毒干扰载体,为
进一步行喉癌CD47基因功能研究提供了较好的实验工具。
关键词:CD47;RNA干扰;慢病毒载体;构建鉴定;Hep一2细胞
中图分类号:R739.65 文献标识码:A
Constructionof lentiviralvectorshRNAofCD47
targeted
8
in cells
anditseffectofCD47 silence
gene gene Hep一2
GAO Lian,LILi,YANG
Shao—rong,XU Chun—ping,
Shu-feng,ZHANG
LIU Yue—hui
Jian-guo,WANGMei-qun,LIUHong—bing,LIU
andNeck Second
of Surgery,theAffiliatedHospital,
(DepartmentOtorhinolaryngology,Head
NanchangUniversity,Nanchang,Jiangxi330006,P.R.China)
lentiviralvectorofCD47 andtoevaluate
constructshort RNAinterference
Ab
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