CD47一shRNA慢病毒载体构建及其介导Hep一2细胞CD47基因沉默.PDFVIP

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第24卷第9期 中国现代医学杂志 V01.24No.9 ofModernMedicine Mat.2014 2014年3月 ChinaJournal 文章编号:1005-8982(2014)09-0001—06 ·论著· 细胞CD47基因沉默效应鉴定冰 高树峰,张少容,徐 莲,李 黎,杨春平,刘建国,汪关群,刘红兵,刘月辉 (南昌大学第二附属医院耳鼻咽喉头颈外科,江西南昌330006) 法设计CD47靶点特异性的寡核苷酸序列,利用酶切反应合成含特异性系列线性化的pGCSIL—GFP载体, 阳性克隆PCR及测 B10tting检测重组慢病毒对CD47靶基因在mRNA和蛋白水平上的沉默抑制情况。结果 序证实针对CD47基因shRNA慢病毒干扰载体构建成功,RT—PCR及WesternBlotting检测载体在rnRNA 和蛋白水平上可抑制喉癌Hep一2细胞的CD47表达。结论成功构建针对CD47基因的慢病毒干扰载体,为 进一步行喉癌CD47基因功能研究提供了较好的实验工具。 关键词:CD47;RNA干扰;慢病毒载体;构建鉴定;Hep一2细胞 中图分类号:R739.65 文献标识码:A Constructionof lentiviralvectorshRNAofCD47 targeted 8 in cells anditseffectofCD47 silence gene gene Hep一2 GAO Lian,LILi,YANG Shao—rong,XU Chun—ping, Shu-feng,ZHANG LIU Yue—hui Jian-guo,WANGMei-qun,LIUHong—bing,LIU andNeck Second of Surgery,theAffiliatedHospital, (DepartmentOtorhinolaryngology,Head NanchangUniversity,Nanchang,Jiangxi330006,P.R.China) lentiviralvectorofCD47 andtoevaluate constructshort RNAinterference Ab

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