自然界中有用微生物之筛选-建国科技大学.PDF

BS-01 自然界中有用微生物之篩選 指導老師：蕭蓉禎 組員：賴靜瑜、楊伊婷、李素惠、黃詠瑄、蕭庭荔、張瀞文 建國科技大學 美容系 一、簡介： 本論文分別利用紫外線照射試驗及澱粉酶篩選試驗，進行抗紫外線菌種及有用的酵素 種類之研究。由 55 個樣品土壤中，篩選出能抵抗紫外線傷害的菌株，並進行 16S rRNA 基 因序列分析與染色體資料庫比對。在澱粉酶篩選方面我們找到35 株菌株能分泌澱粉酶的微 生物，由於澱粉酶活性不佳，因此，我們並未深入探討。 二、動機： （一）微生物存在於自然界中，其所分泌的酵素或代謝物質有些能讓人類應用於各種 生活產品中，如醬油、乳酪等。我們想利用土壤中所存在的微生物進行實驗，觀察是否可 找到能被利用的微生物或酵素，探討其在生活用品上的應用性。 （二）為了要避免或改善紫外線對人體造成的傷害，坊間所研發出產的防曬用品、隔 離霜、防曬乳…等不勝枚舉，本實驗主要目的是找尋在自然界中存在，並能抵抗紫外線傷 害的微生物，想藉由生物技術進行此種微生物的鑑定及分析，並進一步去探討菌體的抗紫 外線機制，讓我們能了解細菌防止紫外線傷害的原理，以期能發展出抗紫外線傷害的化妝、 保養品等商品。 三、目的： 研究設計中我們使用選擇性培養基來分離不同樣品中的微生物，找出能分泌有用酵素 之微生物，並且在實驗中利用分離菌株的方式由土壤中尋找出抗紫外線的菌種，觀察紫外 線對於菌種的影響。本實驗的目的在探討酵素對於生活必需品上的利用，了解酵素的種類 及分類，以及其作用方式，並應用於各產業的產品上。並探討菌種應用在生活用品中的可 行性。 四、特色： 陽光輻射對人體會造成很多的生理變化，紫外線在日常生活中也是有很多的好處對於 含細菌、真菌、病菌等許多的菌體都有良好殺滅效果。對於被消毒的物體，無任何的副作 用。對於日常生活中有許多的消毒殺菌方式被發現，有化學消毒法、物理消毒法等方法可 選擇，例如一些生化研究、製藥工業、食品工業等工業對於這些大面積、大空間的物體表 面殺菌及空氣消毒，因此被廣泛的應用。 五、研究方法： 搜集各地的土壤做實驗，把試管先加入 1 ml 的無菌水，防止樣品土沉積在試管底下。 秤 2 g 的樣品土加入試管中，再加入 1 ml 無菌水。使用震盪儀器，把試管中的樣品土和無 菌水混合。放置一段時間沉澱，使樣品土與無菌水分離，將無菌水以微量吸取器吸取出上 清液，抽取 100μl 分離後的土水後，塗抹在培養皿中，力道需輕慢，防止培養皿表面破裂 812 BS-01 影響觀察。同一種樣品塗抹 2 個培養皿，一個培養皿至於無菌台內，打開 UV 燈，進行照 射實驗。另一個培養皿於是溫下培養，作為對照皿。每隔一段時間觀察作紀錄。 將經過紫外線照射後仍有長菌的培養基挑出，未確認實驗的正確性，再次將培養基上 長出之菌落，以滅菌過之牙籤選取並點在另兩個新的培養皿上，分別室溫極紫外線照射下 培養，隔天觀察菌落表現情況。 六、結論： 實驗結果篩選出抵抗紫外線照射的菌株應為螢光假單胞桿菌 SBW25 是革蘭氏陰性桿 狀細菌，棲息於土壤。植物和水的表面，最佳生長溫度為攝氏 25-30 度之間，具有多條鞭 毛，是一種好氧菌，具有氧化酶活性。此菌株生長在植物的根際並且能產生多種次級代謝 物，包括抗生素，因而能防止在土壤中傳播的植物病原體。螢光假單胞桿菌會產生一種特 定的抗生素-莫匹羅星(Mupirocin) ，已被證實能有效治療某些類型的皮膚、耳朵及眼睛疾病。 我們所找到的菌株能抵抗紫外線的傷害，也期待未來能進行更深入的研究，探討抵抗 紫外線傷害的保