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第一章前言……………………………………………………………．1
第一节内质网综述……………………………………………………………．1
1．1．1内质网的分类及其功能………………………………………………………．．1
1．1．2内质网上的成管蛋白…………………………………………………………一2
1．1．3内质网应激……………………………………………………………………一3
1．1．4钙离子以及钙泵………………………………………………………………一5
第二节TMC01的简介………………………………………………………．．6
第三节细胞骨架………………………………………………………………．7
1．3．1微管………………………………………………………………………………7
1．3．2微丝…………………………………………………………………………………………………一9
1
1_3．3中间纤维………………………………………………………………………．1
第四节细胞迁移………………………………………………………………12
1．4．1细胞迁移概述…………………………………………………………………12
1．4．2细胞迁移的过程和分子机制…………………………………………………13
第二章材料和方法……………………………………………………14
第一节试剂、仪器和配方……………………………………………………14
2．I质粒序列…………………………………………………………………………14
2．2试剂和仪器………………………………………………………………………15
2．3配方……………………………………………………………………………………………………．17
第二节实验方法………………………………………………………………20
2．2．1蛋白的表达与纯化……………………………………………………………20
2．2．2聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹…………………………………………22
目录
2．2．3BCA蛋白浓度测定法…………………………………………………………24
2．2．4脂质体的制备…………………………………………………………………24
2．2．5蛋白脂质体的重组以及重组效率的检测……………………………………25
2．2．6载体的构建……………………………………………………………………27
2．2．7细胞培养………………………………………………………………………27
2．2．8免疫荧光………………………………………………………………………29
2．2．9流式细胞仪检测细胞周期和胞浆钙水平……………………………………29
2．2．10创伤愈合实验………………………………………………………………．．30
2．2．11Transwell实验………………………………………………………………．．30
2．2．12微管共沉淀…………………………………………………………………一30
2．2．1 1
3钙成像………………………………………………………………………．．3
2．2．14 1
TRJz01法提RNA……………………………………………………………．3
第三章结果分析………………………………………………………33
第一节TMC01功能的初步研究……………………………………………33
3．1．1TMC01的定
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