基因工程4-大分子分离分析.pptVIP

Duracell DNA containing the gene of interest Plant cell Protoplast 电穿孔技术 Power supply DNA inside the plant cell The plant cell with the new gene 三、重组子的筛选 （一）遗传表型直接筛选法 1、根据载体选择标记初步筛选转化子 抗药性筛选 插入失活筛选法 插入表达筛选法 显色互补筛选法 2、营养缺陷型检测法 根据目的基因在受体细胞中表达产物的性质，筛选含目的基因的克隆子。若目的基因产物能降解某些药物使菌株呈现出抗性标记或基因产物与某些药物作用是颜色反应，则可根据抗性或颜色直接筛选含目的基因的克隆子。该方法的使用前提是待选择的目的基因能在受体菌中进行表达。 3、形成噬菌斑筛选法 λDNA载体被外源DNA分子插入后，重组 DNA分子大小必须在野生型λ DNA长度的75~105%范围内，才能在体外包装成具有感染活性的噬菌体颗粒。转导受体菌后，转化子在培养基平板上被裂解形成噬菌斑，而非转化子正常生长。噬菌斑中的λ噬菌体即为重组子。 （二）依赖重组子结构特征分析的筛选法 1、快速裂解菌落鉴定分子大小（质粒快检） 此法主要是根据有外源DNA片段插入的重组质粒与载体DNA之间大小 差异来区