多聚半乳糖醛酸酶反义基因转化加工番茄-中国农学通报.PDF

中国农学通报 2014,30(7):70-76 Chinese Agricultural Science Bulletin 多聚半乳糖醛酸酶反义基因转化加工番茄 1 2 1 1 陈丽萍 ，程智慧 ，赵 根 ，韩明丽 1 2 （湖州市农业科学研究院，浙江湖州313000 ；西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100） 摘 要：利用农杆菌EHA 105介导转化，将PG 基因转入加工番茄B04 植株。通过对影响外植体转化的因 素（预培养时间、侵染时间、农杆菌浓度、共培养时间）进行了深入探讨，建立了加工番茄品种B04 子叶外 植体的高频遗传转化体系，并通过农杆菌介导法将PG 反义基因导入加工番茄品种B04 ，获得PG 抗性植 株。其最佳预培养时间为2 天；当农杆菌的菌液浓度为OD600 ＝0.6、侵染时间为10 min 时转化率最高；其 最佳的共培养时间为2 天。对获得的41 株抗卡那霉素转基因植株进行PCR 检测，其中9 株为阳性植株， 其转化率为22%。初步证实了部分加工番茄B04 植株中已导入PG 反义基因。 关键词：加工番茄；多聚半乳糖醛酸酶(PG) ；反义基因；遗传转化 中图分类号：S641.2 文献标志码：A 论文编号：2013-2033 PolygalacturonaseAntisenseGeneintoProcessingTomato 1 2 1 1 ChenLiping,ChengZhihui,ZhaoGen,HanMingli 1 (HuzhouAgriculturalTechnologyExtensionStation,HuzhouZhejiang313000; 2CollegeofHorticulture,NorthwestAFUniversity,YanglingShaanxi712100) Abstract: AgrobacteriummediatedtransformationusingEHA105,PGgenewastransferredintoprocessing tomatoB04 plants.Throughtheinfluenceofexplantsconversionfactor(pre-culturaltime,invadingtime, concentration of bacteria, total co-cultural time) were studied, to establish a high frequency of genetic transformation system for processing tomato cotyledon explants of B04. Agrobacterium was used for transformation, and then transgenic plantlets with polygalacturonase gene of processing tomato B04 were obtained.Thebestpre-culturingtimewas2d.Thesuitpre-culturaltimeforprocessingtomatowas48hours; OD =0.6 wasthefitfulbacteriaconcentrationforinvading;andthetimeforinvadingwas 10minutes;the