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实验1-3 马薯脱毒试管苗的快速繁殖
实验1-3 马铃薯脱毒试管苗的快速繁殖 1 实验目的 通过本次实验,掌握无菌操作的基本技术;了解马铃薯脱毒种薯生产的过程,为马铃薯脱毒种薯的生产提供必要的基础苗。 2 实验方法:单节茎段扦插(短枝发生型) 3 实验原理 利用适宜的培养基,诱导带有腋芽的马铃薯单节茎段进行芽生长和根再生形成单苗,从而达到快速繁殖的目的。 4 实验用具和仪器 酒精棉球、小块纱布、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已灭菌培养皿、酒精灯、超净工作台等。 5 药品和试剂 马铃薯快速繁殖培养基、75%消毒酒精 6 实验材料 马铃薯脱毒试管 7 实验操作流程 (1)准备工作 ①接种室的清洁和消毒 ②超净工作台的开机和消毒 ③剪刀、镊子、已灭菌培养皿、酒精棉球、酒精灯、待用培养基等的准备 ④ 实验材料的准备 (2)无菌操作 ① 实验操作前,操作人员洗手及手和小臂消毒(注意问题?) ② 使用的镊子、解剖刀等用95%酒精浸泡,之后放在酒精灯上灼烧灭菌,再放在灭菌后的培养皿中冷却后使用。 ③培养瓶外壁的消毒 (2)无菌操作 ④将马铃薯试管苗剪为单节茎段后接种到培养基中,在植入材料的前后,培养瓶的瓶口须在酒精灯火焰上烧烤灭菌。 ⑤封口、标记、将培养瓶置于培养架上,在温度20-25℃,光照强度2000-3000lx,光照时间12-14小时/天的条件下培养。 * * *
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