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* 一、还原糖的检测: 还原糖:具有还原性基团(醛基或酮基)的糖类, 如葡萄糖、果糖和麦芽糖等。 蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。 1、选材:苹果、梨、白萝卜等。(含还原糖较高,颜色为白色或近于白色的植物组织) 2、检测试剂: 斐林试剂 甲液: 0.1g/mL的NaOH 乙液: 0.05g/mL的CuSO4 等量混匀后制成 组织样液2mL 结论 取材 颜色反应 制备组织样液 4、实验步骤 组织液中含有还原糖 产生砖红色沉淀 刚配制的斐林试剂1mL 50~65℃水浴加热两分钟 制浆 过滤(单层纱布) 取液 注意 1.斐林试剂不稳定,使用时,取等量甲液和乙液混合后立即使用 2.选材不可选择甘蔗,甜菜,马铃薯等,甘蔗,甜菜含蔗糖较多,马铃薯含淀粉较多,蔗糖和淀粉为非还原糖 3.选材不可选择葡萄、菠菜等绿叶,因颜色较深,会影响实验结果 2、选材:鸡蛋清、牛奶 3、检测试剂 甲液: 0.1g/mL NaOH 乙液:0.01g/mL CuSO4 双缩脲试剂 二、蛋白质的检测: 1、实验原理:蛋白质(肽键)+双缩脲试剂 紫色 选材与制备 显示反应 结论 大豆组织研磨液或鸡蛋清稀释液 组织样液2mL 双缩脲试剂A液1mL 双缩脲试剂B液4滴 4、实验步骤 大豆组织液或鸡蛋清稀释液中含有蛋白质 组织样液2mL 选材与制备 显示反应 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 质量分数为0.1g/mL NaOH溶液 质量分数为0.05g/mLCuSO4溶液 质量分数为0.1g/mL NaOH溶液 质量分数为0.01g/mLCuSO4溶液 反应原理 还原糖中的醛基或酮基被Cu(oH )2氧化,Cu(oH )2被还原为Cu2O 具有两个肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应生成络合物 添加顺序 甲、乙两液等量混合后立即使用 先加入A液1mL,摇匀,再加入B液4滴,摇匀 反应条件 50~65℃温水浴加热 不需要加热,摇匀即可 颜色变化 浅蓝色 棕色 砖红色沉淀 紫色 斐林试剂与双缩脲试剂的比较 注意 1.双缩脲试剂先加入A液再加入B液,注意与斐林试剂区分 三、脂肪的检测: 组织样液 观察 如组织样液 如用花生 滴苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液 取材 制片 观察 结论 花生种子(浸泡3-4h),将子叶削成薄片 花生种子中有脂肪存在 选最理想的薄片 在薄片上滴1-2滴苏丹Ⅲ(或Ⅳ)染液,染色3min(或1min) 去浮色(用体积分数为50%的酒精溶液) 制成临时装片 在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,然后用高倍镜观察 注意 1.花生切片要足够薄,若太厚,脂肪颗粒观察不清楚 2.花生种子需提前浸泡,时间短,不容易切割;时间长,不成形 *3.用体积分数为50%的酒精溶液去浮色,苏丹Ⅲ(或Ⅳ)是溶于有机溶剂的 *4.检测生物组织实验唯一使用显微镜的实验 四、淀粉的检测 选材与制备 显示反应 结论 马铃薯匀浆 组织样液2mL 碘液2滴 选材 检测 摇匀 马铃薯匀浆中含有淀粉 1.下列对生物体中有关化合物的检测实验的总结,不正确的是( ) 选项 检测对象 试剂 颜色 水浴家热 生物材料 A 淀粉 碘液 蓝色 不需要 马铃薯块茎 B 还原糖 斐林试剂 砖红色 需要 还原糖较高的白色植物组织 C 蛋白质 双缩脲试剂 紫色 需要 豆浆、牛奶、鸡蛋清 D 脂肪 苏丹Ⅳ 红色 不需要 花生种子 C 练一练 2.下列关于对“检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验操作步骤的叙述,正确的是( ) B A.用于检测还原糖的斐林试剂的甲液和乙液,可直接用于蛋白质的检测 B.检测脂肪时,需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪颗粒 C.检测还原糖时,需要加入斐林试剂甲液摇匀后,再加入乙液 D.用于检测蛋白质的双缩脲试剂的A液与B液要混合均匀后,再加入含样液的试管中,且必须现用现配 练一练 3.现有一待样品提取液,经双缩脲试剂检测,样液产生紫色反应,经斐林试剂检测,无明显砖红色沉淀生成,经处理后用苏丹Ⅲ染液检测,不呈现橘黄色。该样品可能是( ) A.无糖全脱脂奶粉 B.纯天然奶粉 C.加果浆的果汁 D.普通纯奶粉 B 练一练
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