碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对兔膝骨关节炎治疗作用及其作用机制的研究-外科学专业论文.docxVIP

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河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学 位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试验材 料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则, 研究生签名:参匆磊导师签 院领导签客,专螨 承担相应的法律责任。 ,o’,妻、≮ 院领导签省i。q少皂乡侈羹: 月形日、io~√:一≥j。 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了 文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名: :膨咄 炒簿;月纺日 中文摘要碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对免膝骨关节炎 中文摘要 碱性成纤维细胞生长因子缓释微球对免膝骨关节炎 治疗作用及其作用机制的研究 摘 要 目的:骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种以关节软骨 损伤为特点的、原因不明的慢性退行性疾病。OA是全球分 布最广、最为流行的疾病之一,严重影响了患者的日常和社 会生活。OA的主要病理改变为关节软骨的损伤、退变及软 骨下骨的硬化、增生、囊变,继而导致关节间隙狭窄。关节 软骨是成熟的透明软骨没有血管和修复细胞,软骨细胞的分 裂潜能及其修复能力非常有限,当关节软骨发生严重退行性 变时进行治疗很困难。目前OA的保守治疗方法虽然很多, 但是治疗效果都有限。对于严重OA的病例只能采用人工关 节置换来治疗,然而关节置换术存在着诸如年龄、手术损伤 大、费用高、长期预后、再次翻修等一系列问题。因此寻找 有效的保守治疗骨关节炎的方法至关重要。碱性成纤维细胞 生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是最有效的 体外软骨细胞分裂素之一,具有加速软骨代谢,促进关节软 骨再生的作用,但bFGF体内半衰期很短仅为3-5min,全身 或局部应用的效果均不能满足临床上治疗需要。因此应用 bFGF缓释制剂对长期维持损伤局部的有效药物浓度有重要 意义。目前研究发现关节软骨组织中的基质金属蛋白酶一13 (matrix metalloproteinases.13,MMP.13)、基质金属蛋白酶抑 制剂.1(tissue inhibitors of metallomatrix一1,TIMP.1)可调控 软骨细胞外基质的合成与降解,参与关节软骨的损伤过程。 中文摘要因此,本实验应用壳聚糖包被bFGF制作缓释微球以长时间 中文摘要 因此,本实验应用壳聚糖包被bFGF制作缓释微球以长时间 维持关节内的有效药物浓度,并观察其抑制OA进展的作用 及其对MMP.13、TIMP.1 mRNA表达的影响。探讨bFGF 持续释放对实验性兔膝关节OA的治疗作用的部分作用机 制。 方法:健康成年新西兰大白兔54只随机选取9只作为 对照组,其余45只作为实验组给予实验干预。于兔双后腿 膝关节腔内注射木瓜蛋白酶建立兔膝骨关节炎模型,将其随 机分为5组,每组9只,分别为模型组、PBS微球组(PBS.M)、 bFGF溶液组(bFGF.S)、1099 bFGF微球组(10.bFGF.M) 及10099 bFGF微球组(100.bFGF.M)。用壳聚糖制成含PBS 及含bFGF的缓释微球,干冻保存备用。分别于第3周及第 6周两次于各治疗组动物关节腔内注射溶液或微球,于第9 周处死动物后取材。肉眼观察兔软骨组织大体形态,采用印 度Ink评分法比较各组动物大体软骨损伤程度;通过HE染 色及PAS染色方法观察软骨组织病理改变,采用Mankin评 分系统评价;应用实时定量RT-PCR检测关节软骨组织 MMP.13、TIMP.1 mRNA表达变化。 结果: 1微球的外观形态及粒径分布 光学及电子显微镜观察到壳聚糖微球外观圆整,粒径分 布均匀,大部分微球粒径分布在3~79rn范围内,平均粒径为 4.694-0.069m。 2各组关节软骨标本Ink评分结果:与对照组相比,模 型组关节软骨损伤程度明显加重(3.38+0.65 VS.O.154-0.37, P0.05):PBS.M组、bFGF.S组与模型组相比,关节软骨损 中文摘要伤程度无明显减轻(3.08+0.64,3.3 中文摘要 伤程度无明显减轻(3.08+0.64,3.3 l士0.63 VS.3.384-0.65,P值 均O.05),而1 O-bFGF.M组和1 00.bFGF.M组关节软骨损伤 程度较模型组明显减轻(1.92+0.49,1.3 1+0.48 VS.3.38+0.65,P

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