基于级联核酸侵入反应的real-timePCR法检测咽拭子样本中UGT1A1.PDF

Hereditas (Beijing) 2018 年 8 月, 40(8): 668 ―675 技术与方法 基于级联核酸侵入反应的real-time PCR 法检测 咽拭子样本中UGT1A1*6 基因多态性 张婕妤，初亚男，邹秉杰，张晏洁，封利颖 南京总医院药理科，南京 210002 摘要 : 伊立替康(irinotecan)不良反应与 UGT1A1*6 单核苷酸多态性相关，目前应用的单核苷酸多态性检测方法 具有耗时长、开盖易污染、操作繁琐等缺点，因此需建立一种操作简便且不易污染的适合临床应用的新方法。 本研究利用3 种已知基因型的DNA 样本建立基于级联核酸侵入反应的real-time PCR 法检测UGT1A1*6 多态性 的最佳反应体系，并对其检测口腔咽拭子样本的灵敏度和准确性进行了考察。结果显示，本文成功建立了基于 级联核酸侵入反应的UGT1A1*6 基因多态性检测方法，可用于咽拭子样本的分型检测，其灵敏度达到6 ng DNA ， 分型准确性达到 100%。因其取样方便对人体无创，单管闭管检测不易产生交叉污染，具有用于临床检测伊立 替康的个体化用药相关 UGT1A1*6 基因多态性的潜力。 关键词 : 核酸侵入反应；UGT1A1*6；基因多态性；伊立替