南开大学基因操作原理课件第二章.ppt

* * 第二章 安 全 防 护 1.概念 2.一些国家基因操作安全规则 3.美国重组DNA研究修改条例 1、概念 生物危害（Biohazard) 生物伦理（Bioethics) 危险度=生物材料危险性× 操作方法危险性× 操作量×操作时间 ×操作次数 3、NIH重组DNA研究修改条例的主要内容 1）.物理防护 四个等级： P1P2P3P4 P1级（最低级）（一般微生物实验室） （1）无特殊防护设备，实验工作在开放式工 作台上进行； （2）不与其它建筑物隔开，允许公众进入； （3）要严格执行标准的微生物实验造作规程，如操作时门窗关闭；工作台消毒；不用嘴吸移液管，至少用棉花塞，再用嘴吸；禁止在实验室吃喝吸烟等等。 P2级实验室(低级)(病原微生物实验室) (1）设有生物安全柜(通风橱); (2）限制外人进入; (3）不准穿工作服到室外,更不能到餐厅,其它同P1。 P3级实验室（中级）严格的病原微生物实验室） （1）与向一般公众开放的地区隔开； （2）向实验室提供定向气流，排出的气流则释放到大气，防止重新进入大楼（排出的空气不准再循环）； （3）一般实验均应在生物安全柜内进行； （4）实验室门口标志生物危险信号； （5）严禁用嘴吸移液管； （6）工作时带手套等等，其它同P1 ，P2。 P4实验室（高级）（可防止微生物逃出室外，密闭的严格的病原微生物） （1）与其他建筑物严格隔离，应是单独建筑物； （2）密闭，单独使用的定向气流通风系统； （3）进出实验室应经更衣室和淋浴室，等等。 其它同P1,P2,P3 2）.生物防护 根据载体-受体系统分级，以E.coliK12作受体的情况下，生物防护分三级，表示为：EK1EK2EK3。 （1） EK1级：一般常用的载体受体系统，如质粒，入作载体， E.coli作受体。 （2）EK2级：用遗传学方法构建的具有高级生物防护功能的载体-受体系统，在非许可的条件下，即使重组DNA感染非特定受体，一定没有活性（如果有活性，一般不会超过10-8）一般受体为r-m-su＋，载体如入，一般携带am突变。 （3）EK3级：EK3级系统单独用于动物体内实验（制定该条例时，尚无EK3级载体-受体系统。 3）.重组实验采用防护等级规定 （1）真核DNA重组 a.灵长类 P3+EK3 or P4+EK2 b. 哺乳类 P3+EK2 c. 鸟类 P3+EK2 d.低等真核生物 能产毒素的 P3+EK2 一般者 P2+EK1 e. 植物 P2+EK1 (携带病原体的，P3+EK2) * * * *