第5章色谱分析法.ppt

5.6.2 超临界流体色谱仪的结构流程 1.结构流程 2.主要部件 （1）SFC的高压泵 无脉冲的注射泵，通过电子压力传感器和流量检测器，计算机控制流动相的密度和流量。 （2）SFC的色谱柱和固定相 可以采用液相色谱柱和交联毛细管柱； SFC的固定相：固体吸附剂（硅胶）或键合到载体（或毛细管壁）上的高聚物。 使用专用的毛细管柱SFC。 主要部件 （3）流动相 SFC的流动相：超临界流体，如CO2，N2O，NH3等。 CO2应用最广泛，无色，无味，无毒，易得，对各类有机物溶解性好，在紫外光区无吸收。缺点：极性太弱。可加少量甲醇等改性。 （4）检测器 可采用液相色谱检测器， 也可采用气相色谱的FID检测器。 用纯物质直接对照定性分析的示意图 纯物质：a 甲醇 b 乙醇 c 正丙醇 d 正丁醇 e 正戊醇 利用加入法定性： 将纯物质加入到试样中，观察各组分色谱峰的相对变化，确定与纯物质相同的组分。 分离不完全时，不同物质可能在同一色谱柱上具有相同的保留值，在一支色谱住上按该方法定性的结果并不可靠。 这种方法的局限性，首先对试样有一定的了解，通过加入已知物对未知试样中某组分作最后的确证。 2.利用文献保留值定性 （1）相对保留值r21： 相对保留值r21仅与柱温和固定液性质有关。 在色谱手册中都列有各种物质在不同固定液上 的保留数据，可以用来进行定性鉴定。 （2）保留指数 又称Kovats指数(Ⅰ)，是一种重现性较好的定性参数。测定方法： 将正构烷烃作为标准，规定其保留指数为分子中碳原子个数乘以100（如正己烷的保留指数为600）。其它物质的保留指数（IX）是通过选定两个相邻的正构烷烃，其分别具有Z和Z＋1个碳原子。被测物质X的调整保留时间应在相邻两个正构烷烃的调整保留值之间如图： 保留指数计算方法 例题:乙酸正丁酯在阿皮松L柱上，柱温为100℃时的保留指数为例加以说明。选正庚烷，正辛烷两个正构烷烃，乙酸正丁酯的峰在此两正构烷烃色谱峰的中间。 设相当于调整保留时间的记录纸距离为： 正庚烷（n-C7） =174.0mm lg174.0=2.2406 乙酸正丁酯 = 310.0mm lg310.0=2.4914 正辛烷（n-C8） = 373.4mm lg373.4=2.5722 Z=7，将上述数据代入式： 同一物质在同一色谱柱上，其保留指数I值与柱温呈直线关系，这就便于用内差法或外推法求出不同柱温下的 I 值。其准确度和重现性都很好。 因此只要柱温和固定液相同，就可以用文献上发表的保留指数进行定性，而不必用纯物质。 3.与其他分析仪器联用的定性方法 小型化的台式色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS） 色谱-红外光谱仪联用仪； 组分的结构鉴定 Sample Sample 5890 1.0 DEG/MIN HEWLETT PACKARD HEWLETT PACKARD 5972A Mass Selective Detector D C B A A B C D Gas Chromatograph (GC) Mass Spectrometer (MS) Separation Identification B A C D 5.5.2 色谱定量分析方法 色谱法用于组分的定量分析，其结果远比用光谱分析，质谱分析等仪器分析准确。在一定色谱操作条件下，分析组分i的质量（mi）或其在载气中的浓度与检测器的响应信号（色谱上表现为峰面积Ai或峰高hi）成正比的，即 mi=fi′Ai 在定量分析中，需要解决三个问题： （1）准确测量峰面积； （2）准确求出比例常数fi′（称为定量校正因子）； （3）根据上式正确选择计算方法。将测得组分的峰面积换算成质量分数。 1.峰面积的测量 （1）峰高（h）乘半峰宽（Y1/2）法：近似将色谱峰当作等腰三角形。此法算出的面积是实际峰面积的0.94倍： A = 1.065 h·Y1/2 （2）峰高乘平均峰宽法：当峰形不对称时，可在峰高0.15和0.85处分别测定峰宽，由下式计算峰面积： A = h·（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留时间法：在一定操作条件下，同系物的半峰宽与保留时间成正比，对于难于测量半峰宽的窄峰、重叠峰（未完全重叠），可用此法测定峰面积： A = h