第十章蛋白质和基酸的测定.pptVIP

氨基酸的分析 什么是氨基酸? 氨基酸的分类 氨基酸的化学结构? 氨基酸的两性电解质的特性 2D TLC AAs assay by GC 1．原理 将本身没有挥发性的氨基酸转变为适合于气相色谱分析的衍生物——三氟乙酰基氨基酸正丁酯。它包括用正丁醇的酯化和用三氟乙酸酐（TFAA）的酰化两个步骤。将酰化好的氨基酸衍生物进行气相色谱分析。 AAs assay by HPLC 1.高效液相色谱法适于分析沸点高、分子量大、热稳定性差的物质和生物活性物质。 2. 由于大多数氨基酸无紫外吸收及荧光发射特性，而紫外吸收检测器和荧光检测器是HPLC仪的最常的检测器。故人们需将氨基酸进行衍生化，使其可以利用紫外吸收或荧光检测器进行测定。 3.氨基酸的衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。柱后衍生需额外的反应器和泵，常用于氨基酸自动分析仪，如前文所提的茚三酮反应。 4. 在氨基酸的HPLC测定中，更多的还是采用柱前衍生法，这是因为比起柱后衍生法它的优点有：（1）固定相采用C18(反相色谱)，可分辨分子结构细小的差异；（2）流动相为极性溶剂，如甲醇、乙二腈等，避免对荧光检测的干扰，可提高灵敏度及速度；（3）一机多用。 * 第十章 蛋白质和氨基酸的测定 第一节 概述 1，蛋白质是生命的物质基础： 是构成细胞的组成成分：细胞膜中的蛋白质，线粒体、内质网等细胞器上的结构蛋白或酶，染色体中的核蛋白，血液中的血红蛋白