环境微生物学试验指导书-农业资源与环境试验教学示范中心-江西.PDF

环境微生物学实验指导书 王 华 主编 江西农业大学 国土资源与环境学院 2007 年 10 月 目 录 微生物实验须知……………………………………………………………3 实验一 显微镜使用与细菌染色法………………………………………5 实验二 放线菌与霉菌形态观察…………………………………………10 实验三 污水环境细菌运动性与原生动物、藻类的形态观察…………11 实验四 微生物的大小测定与数量的测定………………………………12 实验五 培养基的制备与灭菌……………………………………………16 实验六 环境微生物的分离与生理鉴定实验……………………………18 实验七 环境微生物分离与生理鉴定结果检查…………………………22 实验八 水中总大肠菌群的测定－多管发酵法…………………………24 2 微生物实验须知 微生物学实验课的目的是：训练学生掌握微生物学最基本的操作 技能；了解微生物学的基本知识；加深理解课堂讲授的某些微生物学 理论。同时,通过实验,培养学生观察、思考、分析问题和解决问题的 能力；实事求是、严肃认真的科学态度以及勤俭节约、爱护公物的良 好作风。为了上好微生物学实验课,并保证安全,特提出如下注意事项： 1．每次实验前必须对实验内容进行充分预习,以了解实验的目的、原 理和方法,做到心中有数,思路清楚。 2．认真及时做好实验记录,对于当时不能得到结果而需要连续观察的 实验,则需记下每次观察的现象和结果,以便分析。 3．实验室内应保持整洁,勿高声谈话和随便走动,保持室内安静。 4．实验时小心仔细,全部操作应严格按操作规程进行,万一遇有盛菌试 管或瓶不慎打破、皮肤破伤或菌液吸入口中等意外情况发生时,应立即 报告指导教师,及时处理,切勿隐瞒。 5．实验过程中,切勿使酒精、乙醚、丙酮等易燃药品接近火焰。如遇 火险,应先关掉火源,再用湿布或沙土掩盖灭火。必要时用灭火机。 6．使用显微镜或其他贵重仪器时,要求细心操作,特别爱护。对消耗材 料和药品等要力求节约,用毕后仍放回原处。 3 7．每次实验完毕后,必须把所用仪器抹净放妥,将实验室收拾整齐,擦 净桌面,如有菌液污染桌面或其他地方时,可用 3%来苏尔液或 5%石炭 酸液覆盖其上半小时后擦去,如系芽孢杆菌,应适当延长消毒时间。凡 带菌之工具(如吸管、玻璃刮棒等)在洗涤前须浸泡在 3%来苏尔液中进 行消毒。 8．每次实验需进行培养的材料,应标明自己的组别及处理方法,放于教 师指定的地点进行培养。实验室中的菌种和物品等,未经教师许可,不 得携出室外。 9．每次实验的结果,应以实事求是的科学态度填入报告表格中,力求简 明准确,并连同思考题及时汇交教师批阅。 10．离实验室前应将手洗净,注意关闭门窗、灯、火、煤气等。 4 实验一 显微镜使用与细菌染色法 一、实验目的 1．学习掌握显微镜的结构、功能和使用方法。 2 ．学习掌握细菌简单染色和革兰氏染色方法。 二、显微镜的结构与功能 1．显微镜的结构 显微镜有机械装置和光学系统两大部分组成。机械装置主要作用是使光学系统， 紧固在一个光轴直线上，而且可精确地调节各光学系统部件之间的距离，使显微镜产 生清晰的物象。其组成包括：①镜座和镜臂；②镜筒；③物镜转换器；④载物台；⑤ 调焦装置（粗调节器和细调节器）。光学系统使显微镜最主要地部分，起分辨和放大 目的物地作用。其组成包括：①目镜；②物镜；③集光器；④反光镜；⑤光源（自然 光源和电光源）。 光学显微镜基本结构：