定量免疫实验讲述.pptVIP

Table 4-2: Enzymes and substrates for the ELlSA. 实践 人表皮生长因子ELISA试剂盒 Thank you! Text Text Text Add your title 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Content welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 请在此添加段落内容 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Content welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 请在此添加段落内容 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Content welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 请在此添加段落内容 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Content welcome to use these PowerPoint templates, New Content design, 10 years experience 请在此添加段落内容 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Add your title 请在此添加段落内容……, 请在此添加段落内容…… Content 请在此添加段落内容……请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容……请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Content 2 3 1 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容……请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… Content A B C D E text text text text text Content 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 请在此添加段落内容…… 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 定量免疫实验 ——赵丽娅 一、原理 定量免疫实验的原理是基于抗原 - 抗体的反应。即抗原决定簇与抗体结合部位相结合，这种结合，这是由氢键，离子键，疏水相互作用，以及范德华力来实现的，它是一种平衡反应，符合质量相互作用定律。 由于抗体－抗原的结合具有特异性和专一性的特点，这种检测可以定量地检测某一特异的蛋白（抗原或抗体）。 抗原抗体反应的速度，跟温度相关，适当的增加温度，或者降低温度，可以改变抗原抗体的反应时间。 二 、应用 在医疗诊断和研究中测定生物分子的浓度，例如，激素，细胞因子，和肿瘤标志物或者小的化学分子，可用于各种疾病的 诊断、疗效评价及发病机制的研究。免疫测定法的优点是它具有很高的灵敏度。测定的灵敏度ng 甚至pg水平。 三、常用方法 1、双抗体夹心法 将已知抗体结合在固相载体，加入待测的样品（抗原），再加入酶标抗体。最后再加入酶的显色底物与之反应显色。在测定时，受检标本（测定其中的抗原）与固相载体表面的抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗体，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 2、竞争法 小分子半抗原如地高辛、茶碱等因其只有一个抗原决定簇，可采用竞争抑制法测定。竞争法就是将待检抗原和标记的抗原竞争的 与固相的抗体结合，样品中抗原含量越多，结合在固相抗体上的酶标抗原就越少，显色越浅。以此便可以检测出未知抗原的量。 操作步骤 1）先用特异性抗体包被固相载体并封