局部黏着斑激酶抑制剂的设计、合成及药理活性初筛-药物化学专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE PAGE 1 局部黏着斑激酶抑制剂的设计、合成及药理活性初筛 研究生：郭小娟 导 师：姜凤超 教授 摘 要 随着分子生物学的快速发展，肿瘤细胞的很多特异性信号转导通路已经被人们所 熟知，针对这些特异性信号通路中的某些重要靶点来进行药物设计,已成为研究抗肿 瘤药的一个重要方法，且由此得出的药物具有较高的选择性和较低的毒副作用。肿瘤 细胞的生长速度快和易于扩散，是肿瘤难于治愈的主要原因。局部黏着斑激酶（FAK） 是一种非受体的酪氨酸激酶，其调节多种细胞作用，过量表达的 FAK 已经在大量的 人类癌细胞中被检测出，如乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、甲状腺癌、卵巢癌等。整合 素和生长因子受体的激活，引起 FAK 在 Y397 位点的自动磷酸化，提供了包含有 SH2 区域或磷酸酪氨酸连接位点的蛋白质合适的结合位点，进而激活大量的下游信号通 路，调节细胞的移动、增殖、存活等多方面的活动，因此设计合成 FAK 的抑制剂便 可以选择性的阻断癌细胞的移动、增殖、存活，对于癌症的治疗具有重要意义。基于 目前进入临床阶段的药物较少，本课题希望通过计算机辅助药物设计软件，在前人工 作的基础上，设计合成出一些高活性高选择性的化合物，并对其进行药理活性的初筛， 为新型抗癌药的设计和结构优化提供实验和理论支持。 本课题研究的主要内容及成果如下： 1、FAK 抑制剂的药效团模型的构建和目标化合物的设计 选取文献报道的具有一定活性的化合物结构及 IC50 值，利用 Catalyst 软件构建出 FAK 抑制剂的药效团模型并进行验证。结合已知化合物的结构特征和上述药效团模 型，以间氨基苯基哌嗪为母体设计 5 个新型的 FAK 抑制剂，同时利用构建出的药效 团模型，进行活性的初步预测，并利用 Pallas3.3.2.6 软件对目标化合物进行了类药性 分析。 2、FAK 抑制剂的合成及结构鉴定 以间溴苯胺为原料，经由碘化亚铜催化的 C-N 偶合反应、甲酰化、酯化等一系列 的反应最终得到目标化合物，利用 UV、MS、1H-NMR、13C-NMR 等方法对目标化合 物的结构进行鉴定，利用 HPLC 对目标化合物进行纯度分析。 3、药理活性初筛及药效团模型的验证 本文选取了 FAK 高度表达的两种人类癌细胞系:MCF-7，Caco-2，利用 MTT 检测 法体外检测目标化合物对肿瘤细胞的抑制率。实验结果表明目标化合物 A-D 对 MCF- 7，Caco-2 都具有很好的抑制作用，而 E 的作用规律性较差。其中 D 的作用较好，在 较低浓度时（4μmol/L）也有一定的抑制作用，特别是对 Caco-2 有较好的抑制作用， IC50 为 15.47μmol/L，具有进一步开发的潜力。将药理活性的实验值与药效团模型的 预测值进行对比，可以发现预测活性与实际活性具有一定的一致性，表明 FAK 抑制 剂的药效团模型对化合物的设计具有一定的指导和预测作用。 4、创新点 构建了 FAK 抑制剂的药效团模型，设计并合成出 5 个对相关肿瘤细胞具有抑制 作用的，且未见文献报道的全新化合物；在目标化合物合成过程中，根据化合物的特 性对碘化亚铜催化的 C-N 偶合反应及后处理方法进行了改进。 关键词：局部黏着斑激酶；恶性肿瘤；药效团模型；计算机辅助药物设计；间氨基 苯基哌嗪 Abstract With the rapid development of molecular biology,many of the specific tumor cell signal transduction pathway has been known.According to some important targets in these specific signal transduction pathways has become an important method for drug design，by this method we can get high selectivity and low toxicity drug. The rapid growth and easy diffusion of tumor cells are the main reason of difficult to cure tumor. FAK is one of non-receptor tyrosine kinase, regulates a variety of cell functions. Excessive expression of FAK has been detected in a large number of hu