课件：肿瘤的基因诊断.ppt

标志分类 机制 分子标志 应用于癌症诊断 分子遗传性　 染色体易位 　 t(9；22)，t（14；18），t(11；12)等 白血病、淋巴瘤等 点突变　 p53,ER ras等　 胃癌、膀胱癌、乳腺癌、前列腺癌、结肠癌、胰腺癌、肺癌等 缺失 BRCA1，BRCA2，DCC等 乳腺癌、结肠癌 改变拼接 CD44，muc-1,VLA-4等 结肠癌、肾癌、乳腺癌、脑瘤等 扩增 erb-B2,EGFR,N-myc,ras 乳腺癌、脑瘤、神经母细胞瘤 比例改变 明胶酶A/TIMP2 乳腺癌转移等 病毒性 病毒转化 HPV,HCV,HBV，EBV 宫颈癌、肝癌、鼻咽癌等 组织性　 组织分化　 PSA,PSMA 前列腺癌 muc-18,酪氨酸酸酶，Mage-3 黑素瘤 AFP,白蛋白 肝癌 甲状腺球蛋白 甲状腺癌 NPGP9.5，酪氨酸羟化酶表面活性物质等 神经母细胞瘤 肿瘤性 肿瘤细胞特征 CEA 肺癌、结肠癌、胃癌、乳腺癌 β-HCG 黑素瘤等 CK-19 肺鳞癌 端粒酶 结肠癌、乳腺癌、头颈部癌等 微卫星体等 结肠癌、乳腺癌、头颈部癌等 表3? 肿瘤基因诊断的分子标志及其应用 ? 可分为四大类 组织特异性基因标志 肿瘤特异性基因标志 血管生成因子 其它与肿瘤转移相关的分子及基质蛋白酶及其抑制剂 肿瘤转移基因标志物 组织特异性基因标志物 指肿瘤组织和/或起源正常组织所特有，在淋巴组织和血细胞中不存在的。如角质蛋白家族（CK）mRNA、粘蛋白基因、表皮生长因子受体（EGFR）mRNA等。 . 肿瘤特异性基因标志物 存在于肿瘤及其起源的正常细胞中，不存在于其他细胞。 如CEA mRNA、AFP mRNA、PSA mRNA等。 血管生成因子 如血管内皮细胞生长因子（VEGF）等。 肿瘤抗药基因 对于肿瘤化疗效果及预后进行推测； 还可以将肿瘤抗药基因导人骨髓细胞，特别是骨髓干细胞中，提高机体对于抗肿瘤化疗药物的耐受程度，如此可以加大抗肿瘤化疗药物的使用剂量，提高抗肿瘤化疗的治疗效果。 肿瘤抗药基因 多药抗性基因一l（MDR1），其编码的蛋白如P-糖蛋白起排流泵作用。 . 其它一些与细胞内药物代谢有关的基因也可以看作是肿瘤抗药基因，如谷胱苷肽S一转移酶（GST），可使机体解毒功能增强；癌基因 bcl-2的表达可抑制肿瘤化疗药物所诱导的肿瘤细胞程序化死亡等。 . 突变的癌基因 癌基因的突变是癌基因激活的重要方式和途径。除了见到较大范围片段的缺失或插人以及染色体转位之外，大多数情况下，都是少数核苷酸或单个碱基的突变。 . 癌基因点突变的检测 单链构象多态性（SSCP）检测技术等 . 肿瘤相关的病毒基因 EB病毒（EBV） 人乳头瘤病毒（HPV） 乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）感染 对于这些肿瘤组织细胞中相关病毒基因及其编 码产物的检测，可以作为这些类型的肿瘤诊断的标志。 致瘤病毒引起的恶性转化作用引起了人们极大的关注 肿瘤基因诊断的常用方法 PCR、RT-PCR Southern blot杂交技术、Northern blot杂交技术 基因芯片 基因测序。 肿瘤基因的分子诊断意义 1.肿瘤的早期诊断和筛选 2.肿瘤疗效监测 3.肿瘤的预后判断 4.肿瘤微转移检测 肿瘤基因检测在肿瘤微转移检测中应用举例 前列腺癌特异性基因DD3PCA3 DD3PCA3是一种非编码RNA的基因，定位于9q21～22染色体。它为前列腺癌特异性基因之一，DD3PCA3 mRNA仅在前列腺癌细胞中表达，而在其它正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达。 DD3 mRNA 14外显子扩增结果 M：50bp DNA Ladder；1：LNCaP阳性对照；2 ～ 3：PCa；4：PIN；5 ～ 6：BPH；7：直肠癌；8：直肠癌癌旁；9：结肠癌；10：结肠癌癌旁；11：乳腺癌；12：甲状腺癌；13：胃癌；14：胃癌癌旁；15：膀胱癌；16：软组织纤维肉瘤；17：转移性腺癌；18：淋巴结转移性黑色素瘤；19：卵巢成熟性畸胎瘤；20：正常肝脏；21：胆囊；22：胎盘；23：试剂空白。 DD3 mRNA 13外显子扩增结果 M：50bp DNA Ladder；1：LNCaP阳性对照；2 ～ 3：PCa；4：PIN；5 ～ 6：BPH；7：直肠癌；8：直肠癌癌旁；9：结肠癌；10：结肠癌癌旁；11：乳腺癌；12：甲状腺癌；13：胃癌；14：胃癌癌旁；15：膀胱癌；16：软组织纤维肉瘤；17：转移性腺癌；18：淋巴结转移性黑色素瘤；19：卵巢成熟性畸