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核酸的光谱学和热力学特性 要点 核酸的紫外光吸收 DNA的纯度 核酸定量 减色效应和增色效应 热变性及复性 核酸的紫外吸收 减色效应 单一核苷酸RNA和ssDNAdsDNA,这种dsDNA相对于ssDNA吸收值减少的现象就成为减色效应。 dsDNA吸收值之所以最少，是由于碱基在疏水环境中的堆积所造成的。 　　　在研究核酸、核苷酸、核苷及碱基时，可以此对核酸进行定性及定量分析。另外，紫外线照射可引起DNA突变，也是由于存在于DNA中的核苷酸吸收紫外光所造成的。 OD260的应用:核酸定量 1. DNA或RNA的定量 OD260=1.0相当于 50 ?g/ml双链DNA 40 ?g/ml单链DNA（或RNA） 20 ?g/ml寡核苷酸 2.判断核酸样品的纯度 DNA纯品: OD260/OD280 = 1.8 RNA纯品: OD260/OD280 = 2.0 核酸定量 在研究核酸、核苷酸、核苷及碱基时，可以此对核酸进行定性及定量分析。 DNA纯度 dsDNA的A260/A280=1.8 RNA的A260/A280=2.0 蛋白质的最大吸收峰为280nm 如果A260/A2801.8,说明有RNA污染。 如果A260/A2801.8，说明有蛋白质污染。 溶解性： RNA和DNA是极性的化合物都微溶于水不溶于乙醇乙醚、氯仿等有机溶剂。 在生物细胞内都与蛋白质结合成核蛋白