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插入 * * 叶绿体中色素的提取和分离 化隆四中 马海龙 【实 验】 一、实验原理 1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮(有机溶剂:酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取叶绿体中色素。 2.色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可用层析液将不同的色素分离。 实验步骤 1. 提取叶绿素 研磨法提取光合色素 材料剪碎 研磨法 加入有机溶剂 研磨、匀浆 过滤 提取液 二、实验程序 叶绿体中色素的对比 位于中上层,呈黄色 蓝紫光 黄色 叶黄素 位于最上层,呈橙黄色 蓝紫光 橙黄色 胡萝卜素 类胡萝卜素 (占1/4) 位于最下层,呈黄绿色 红光、蓝紫光 黄绿色 叶绿素b 位于中下层,呈蓝绿色 红光、蓝紫光 蓝绿色 叶绿素a 叶绿素 (占3/4) 定性滤纸上显现的色素层析图谱 吸收光谱主要部位 色素颜色 项目 三、实验关键 1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。 2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准,重复画线时必须等上次画线干燥后再进行,重复2-3次。 3.层析时不要让滤液细线触及层析液。 四、注意事项 1.因丙酮和层析液都是易挥发且有一定毒性的有机溶剂,所以研磨要快,收集的滤液要用棉塞塞住,层析时要加盖,尽量减少有机溶剂的挥发。 2.在研磨时要加少许二氧化硅,目的是为了研磨充分,有利于色素的提取;加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中,叶绿体中的色素受到破坏。 3.分离色素时,一定不要让滤纸条上的滤液细线接触到层析液,这是因为色素易溶解在层析液中,导致色素带不清晰,影响实验效果。 1.在叶绿体中色素的提取与分离实验中,扩散速度最快的色素是(D) A.叶绿素a B.叶绿素b C.叶黄素 D.胡萝卜素 2.用韭菜做“叶绿体色素的提取和分离实验”,下列不能用作提取剂的是(A) A.水 B.丙酮 C.酒精 D.CCl4 3.做色素提取和分离实验的正确装置是图中(D) 4.在进行叶绿素提取和分离实验时,不能让层析液没及滤液细线的原因是(C) A.滤纸条上几种色素会扩散不均匀而影响实验结果 B.滤纸条上滤液细线会变粗而使色素太分散 C.色素会溶解在层析液中而使结果不明显 D.滤纸条上几种色素会混合起来 5.某人做叶绿体中色素分离实验时,使用的是圆形滤纸,装置如下图。实验结束时在圆形滤纸上形成四个同心色素圆环,则最内圈所呈颜色为(D)
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