2.2们.2动物细胞融合与单克隆抗体.pptVIP

学校：广灵二中 姓名：孙海峰 教学目标： 1简述动物细胞培养的过程、条件及应用。 2简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景。 3举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。 教学重点和难点： 1动物细胞培养的过程及条件。 2用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程。 3单克隆抗体的制备和应用。 引入新课 1970年，有两位科学家做了一个人—鼠细胞融合实验，以证明细胞膜上的蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人—鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后还有什么用途呢？这就是今天我们这节课学习的内容。 温故知新 1植物体细胞杂交的过程是怎样的？ 2动物细胞和植物细胞有何不同 ？ 无细胞壁、无明显的液泡、无质体 全能性受限制，不能发育成杂种动物 6、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较： 7、意义及用途 ⑴打破生殖隔离，使远缘杂交成为可能； ⑵广泛应用多个学科领域； ⑶重要用途：制备单克隆抗体。 （一）、单克隆抗体的概念 思考： ①对小鼠做何处理？ ②细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？ ③杂交瘤细胞的特点：既能大量 ，又能产生 。 ④产生抗体的杂交瘤细胞如何筛选出来的？ 右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？　　。原因是　　 　 　。　（2）图中②为　　　过程，常用_ 　　　　作为诱导剂。该细胞继承了　 　 　，因此不仅能分泌　 　　 ，还有_ 　　 　　本领。（3）该方案的目的是　　 。 作业 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞？ * 植物体细胞杂交的过程 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 原生质 体融合 杂种细胞 组织培养 杂种植株 去细胞壁 纤维素酶、果胶酶 化学法 物理法 筛选 一、动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 学习新课 2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？ 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？ 离心、振动、电激等物理方法；PEG等化学方法 动物细胞无细胞壁，动物细胞融合过程中不须去除细胞壁和再生出细胞壁。 １、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 　　 讨论 不能，只能得到杂交细胞 4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？ 能，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导 ５、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？　 讨论 相同，都是细胞膜的流动性 6、为什么要用灭活的病毒？ 病毒一般对生物体是有伤害的。 7、动物细胞融合有什么意义？ 突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。 仙台病毒 物理或 化学方法 丧失感染活性 保留融合活性 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂种细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 生物法： 灭活的病毒 （丧失感染性、保留抗原结构） 5、过程： 制备单克隆抗体 除以上方法，还有生物法 使细胞分散后诱导细胞融合 细胞膜的流动性 动物细胞融合 获得杂种植株 物理法（离心、振动、电激）化学法（聚乙二醇 去壁后诱导原生质体融合 细胞膜的流动性 植物体细胞杂交 用法 诱导手段 细胞融合的方法 细胞融合的原理 比较项目 1 抗体是由何种细胞产生的？ 2 抗体是如何产生的？ ？ 二、单克隆抗体 ？ 3 传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？ 产量低、纯度低；而且制备抗体特异性差。 4 B淋巴细胞与抗体的关系 　⑴．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生特异性抗体。 　⑵．动物在免疫反应过程中，体内产生特异性抗体种类可 达百万种以上，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　⑶．但每一个Ｂ淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。　 　⑷.在体外，一个Ｂ淋巴细胞是不可能无限增殖的。　 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 （二）、单克隆抗体的制备 1、设计方案： 创始人：米尔斯坦 一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 骨髓瘤细胞