用镱离子和邻苯二酚紫定性定量检测人体尿液和血清-分子科学研究所.PDF

维普资讯 V01．27 高等 学校 化 学学报 No．10 2006 年 10』】 CHEMICALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES l849～l852 用镱离子和邻苯二酚紫定性定量检测 人体尿液和血清 中的无机磷酸根 阴彩霞，霍方俊，杨 频 (山西大学分子科学研究所，化学生物学与分子工程教育部重点实验室，太原 030006) 摘要 用摩尔比为2：1的YbC1和邻苯二酚紫，在pH=7．0的HEPES缓冲溶液中，定性、定量检测人体尿液 和血清中的无机磷酸根．随着尿液或经过处理后血清液的加入 ，在uV—Vis吸收光谱上，由623nm的最大吸 收峰逐渐向444nm的最大吸收峰转移，同时体系的颜色由蓝变黄．该体系对尿液和血清中的无机磷酸根相 对其它成分显示 了很好 的选择性．测得健康人尿液和血清 中无机磷酸根的平均含量分别为23．25和 1．14mmol／L，测定结果与无机磷酸根正常释放基本吻合． 关键词 无机磷酸根；尿液；血清；邻苯二酚紫(PV)；三氯化镱；紫外一可见光谱 中图分类号 0657，32 文献标识码 A 文章编号 0251-0790(2006)10—1849-04 磷酸根参与许多重要的生物矿化过程，诸如骨骼的形成以及肾结石起源这些病理过程，因此其在 生物液体中的检测非常重要 ¨J．已有人研究尿结石和肾结石形成的因素 ，结果表明，尿液中含有 过多的无机磷酸根是形成尿结石和肾结石的原因之一．虽然许多仪器方法已用于检测尿液中的无机磷 酸根 J，但在临床样品中检测尿液中的无机磷酸根时，离子色谱等仪器只有较窄的线性范围．由于 直接测量浓度太高，这些检测仪器需要对试样进行广泛的人工稀释，才能使测量结果准确．因此开展 直接检测尿液中的无机磷酸根是一个挑战性的任务． 在临床上，检测血清中的无机磷酸根作为常规血样分析的一个部分．在人体血清中标准的无机磷 酸根的浓度范围是0．81～2．26mmol／Llloj．个体血清中含有反常高的无机磷酸根可确定为高磷酸盐过 多，这表明其有急性的或慢性的肾衰竭，而血清中无机磷酸根含量低的个体将因血磷酸盐过少而引发 软骨病、甲状腺机能亢进等疾病 ¨． 我们研究发现了一种简单、灵敏的在水溶液中检测无机磷酸根的探针，这种体系由在pH=7．0的 HEPES缓冲溶液中加入摩尔比为2：1的YbC1和邻苯二酚紫组成 ¨．人体尿液和血清中的无机磷酸根 的浓度与生理和病理密切相关 ¨，以往用于检测血清中无机磷酸根的比色法，有的基于磷钼酸进一步 还原为杂聚钼蓝 ¨ ，有的基于直接的测定亚钼和亚钒磷钼酸…’J，或者基于磷钼酸和碱性染料的 配合物 ¨．这些方法存在钼酸盐还原受轻微的pH变化影响，配合物形成的速率受蛋白浓度的严重影 响，需要的pH值将导致有机磷的水解等严重的缺陷，这样都会导致测得的无机磷酸根的浓度偏 高 ．本文应用此体系定性、定量地检测人体尿液和血清中的无机磷酸根，该方法不仅克服了窄的线 性范围，而且避免了以上局限性，具有低的分析价格、高的选择性、稳定性和长寿性．由于其显著的优 点，适合于临床使用，而且有望取代钼试剂． 1 实验部分 1．1 仪器与试剂 HewlettPackardHP一8453型紫外分光光度计；贝克曼酸度计；微量进样 口和微量进样枪；PO一120 石英比色皿；AmiconModel8010超滤器；截留分子量为 10000的PM-10超滤膜；TGL一16B高速台式离 收稿 日期：2006-o2-24 基金项 目：国家 自然科学基金 (批准号资助． 联系人简介 ：杨 频 (1933年出生)，男，教授 ，博士生导师，从事生物无机化学研究．E—mail：yangpin@SXL1．edu．cn 维普资讯 l850 高等 学校 化 学 学报 Vo1，2