原代猪前体脂肪细胞培养方法的优化.PDFVIP

细胞生物学杂志 Chinese Joumal of Cell Biology 2005 , 27: 697 千00 原代猪前体脂肪细胞培养方法的优化 志 李影杨公社卢荣华孙世锋* 杂 (西北农林科技大学， 动物脂肪沉积与肌肉发育实验室， 杨凌712100) 学 摘要 以胎猪皮下脂肪组织为材料，比较不同培养方法、消化酶、筛网孔径和离心力对培 物 养猪前体脂肪细胞的影响。结果表明，组织块法与消化法均可培养出猪前体脂肪细胞，但组织块 法培养的原代细胞中分化为成熟的细胞较少，消化法获得的细胞均匀一致，形态学染色鉴定大部 生 分均可分化为脂肪细胞;在用消化法培养的过程中，采用IV型胶原酶消化脂肪组织， 200 目筛网孔 胞 志 径、 800 g 离心力离心 5 min 可获得大量的、纯度均一的细胞。可以认为，实验成功建立了猪前 体脂肪细胞培养的优化体系，在体外重现了猪前体脂肪细胞增殖肥大的全过程。 细 杂 关键词 猪:前体脂肪细胞:培养方法 学 物 前体脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分 50 ml 胎牛血清，加入各 100 IU/ml 青、链霉素， 化能力的特异化细胞，它持续存在和作用于人和动 四蒸水定容至 500 ml 。消化液:称取 100 mg 凹 生 物的一生[1] 。脂肪细胞增殖和分化失控会导致肥 型胶原酶， 1 g 牛血清白蛋白溶于 100 ml 的无血清 胞 胖，并与糖及脂肪代谢、机体能量平衡、肥胖症、 培养液中。上述溶液均经调整pH 值至7.2-7.4， 0.22 、 0.45μm 微孔滤膜过滤除菌，分装后置4 .C 保存。 11 型糖尿病等有非常密切的关系。因此，选择合适 细 的动物模型在体外重现前体脂肪细胞增殖肥大的全 油红0 工作液:称取4.2 g 泊红0，溶于 1 200 ml 过程对于探讨上述生命和疾病过程具有重要意义。