龙脑的毛细管气相色谱分离分析及定量分析方法.PPT

毛细管气相色谱法测定野菊花挥 发油中龙脑和樟脑的含量 二、内容提要 *气相色谱过程：混合物的分离—各组分的测定 气相色谱分为: 气固色谱（吸附-脱附）(吸附剂) 气液色谱（分配） *两相： 固定相 流动相 固定液 担体 载气 （高沸点的有机溶剂)（惰性固体) H2、N2、He *分离原理：载气携带被分析的气态混合物 通过色谱柱时,各组分在气液两相间反复分 配，由于各组分的K值不同，先后流出色谱 柱得到分离。 *检测：各组分的化学性质、热导率、电性 能学等性质，用相应的检测器，通过电子线 路纪录信号，得到随时间变化的曲线（色谱 图） *定性：色谱峰出现的时间与该组分的性质有关，即保留时间定性（经验规律、保留指数、双柱定性、仪器联用) *定量：峰高或峰面积大小与组分的含量有关 （校正因子、归一化法、外标法、内标法） 三、仪器 瓦里安CP-3800气相色谱仪 气路系统 进样系统 柱分离系统 温控系统 各类检测器 瓦里安CP-3800气相色谱仪器简介 可连用计算机工作站。 可同时安装多达三个进样口： 1079 PTV进样口（可配置五种进样模式） 专用的分流/不分流1177毛细管进样口 1041填充柱进样口 可同时安装三个检测器： FID、TCD 、ECD、TSD(N,P)、PFPD及离子阱MS、四极杆MS/MS（并可同时操作控制）等。 电子流量控制方式 柱箱程序升温7阶8平台，室温+10～450℃。 与本实验有关的仪器配置 毛细管气相色谱，空心柱：??CP-Sil 5 CB （100％二甲基聚硅氧烷）30×0.25mmI.D.×0.25μm film（非极性，几乎完全根据沸点分离） FID检测器 LWMC-205型可调功率微波化学反应器 提取挥发油： 水蒸馏同时溶剂萃取法 微波辅助水蒸馏同时溶剂萃取法 （微波具有穿透力强，选择性高，加热能力强等特点，从而可获得高的萃取速度和萃取效率及较好的萃取质量，因此在中药有效成分的提取中具有很好的应用前景。） 色谱条件 ①氢气与氮气的流量比通常为1﹕1~1﹕1.5；氢气和空气流量之比为1﹕10。载气：N2，流速：1 mL/min。 ②分流比：20︰1 ③检测器：FID ④温度设置：进样口温度250℃；柱温280℃（程序升温程序：从60℃开始, 保持 1 min。再以12℃/min的升温速度到达280 ℃，保持3 min）；检测器温度300℃ ⑤进样量：1 μL FID检测器原理 火焰离子化检测器（FID） 又称氢焰离子化检测器。 FID属质量型检测器 原理： 以氢气和空气燃烧生成的火焰为能源，当有机化合物进入以氢气和氧气燃烧的火焰，在高温下产生化学电离，在高压电场的定向作用下，形成离子流，微弱的离子流 ,经过高阻放大，成为与进入火焰的有机化合物量成正比的电信号，因此可以根据信号的大小对有机物进行定量分析。 FID是一种选择性的检测器，它只能检测那些在氢火焰中燃烧产生大量碳正离子的有机化合物。 影响FID灵敏度的因素： 1）载气和氢气流速：通常以N2为载气，其流速主要考虑其柱效能。但也要考虑其流速与H2流速相匹配。一般N2:H2 = 1:1~1:1.5； 2）空气流速：流速越大。灵敏度越大，到一定值时，空气流速对灵敏度影响不大。一般地，H2:Air = 1:10。 3）极化电压：在50V以下时，电压越高，灵敏度越高。但在50V以上，则灵敏度增加不明显。通常选择100~300V的极化电压。 4）操作温度：比柱的最高允许使用温度低约 50oC(防止固定液流失及基线漂移) 四、实验内容 1、样品制备 （1）水蒸馏同时溶剂萃取法提取挥发油 （2）微波辅助萃取法提取野菊花挥发油 2、测定樟脑,龙脑的标准曲线 （内标标准曲线法） 3、野菊花中龙脑、樟脑含量的测定 五、数据处理 1、记录色谱操作条件。 2、分别测量和绘制樟脑和龙脑的内标标准曲线。 3、测量并计算樟脑/内标和龙脑/内标的峰面积比，从标准曲线中分别测得樟脑和龙脑的量。 4、进一步计算野菊花中樟脑和龙脑的含 量。 六、注意事项 在启动开机程序前确保相应的气体开通 在正常使用仪器的时候，除了可以使用仪器的电源开关外请不要动面板上的任何键，以免误改动仪器或分析方法参数。 仪器运行时严禁打开柱温箱。 仪器运行