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男科学组织工程研究上海第二医科大学附属第九人民医院泌尿外科 姚德鸿 器官畸形、损伤、感染、肿瘤等,一旦切除或毁损后,需要重建、修复或替代,组织工程是一个崭新的途径 组织工程原理 组织工程定义********** 机体细胞,通过特殊培养、增殖与塑形,再移植到宿主身体内, 替代原先器官的全部或部分功能,或达到外形替代与修复的作用。 种子细胞************体内组织中获取自体细胞,或具有免疫保护的异种细胞,经体外分离、纯化、培养、扩增,使其达到一定的数量,以备于种植于能塑形与降解的支架上 细胞支架**************供种子细胞附着、生长、发育与代谢的场所1,天然无细胞基质:例如胶质2,人工合成可生物降解的材料例如聚乳酸、聚乙醇酸、藻酸盐等 支架的要求*************1,生物相容性好,不排斥2,形状与大小能任意塑形3,有孔隙(μm)细胞易粘附4,可被降解吸收自行消失 组织工程化组织************* 对种子细胞的体外体内培养过程进行调控,使其发展分化成需要的具有生物活性的组织 细胞培养系统************ 提供种子细胞生长发育的条件与环境,包括营养、温度、氧气、PH值等 组织工程在男科的应用 睾丸间质细胞睾丸假体阴茎海绵体阴茎假体 睾丸间质细胞组织工程************* 将间质细胞悬浮于藻酸盐溶液中,采用特殊的空气喷射技术,将这些细胞散在地喷入凝胶状的1.5%二氯化钙溶液中,成为一颗颗细胞微粒 Machluf 1998 这些细胞微粒的表面,采用0.1%聚-L-赖氨酸覆盖,最终成为间质细胞的微胶囊 Machluf 1998 此种覆盖是半透明膜状屏障,不允许免疫球蛋白与免疫细胞通过,避免了排斥,但能允许睾酮等激素物质通行 Machluf 1998 实验过程中,采用hCG每24小时对微胶囊进行脉冲式激发,并测定hCG激发后睾酮产生的情况。同时也严密地观察间质细胞每日的成活状况 Machluf 1998 最终微胶囊被注入作过阉割的动物体内,并对该动物进行一系列血清睾酮的测定。接受微胶囊植入的阉割动物体内,居然能保持一定时间的血清睾酮水平 Machluf 1998 睾丸假体组织工程***********小牛肩胛骨关节面上采集软骨细胞,并将其移植于表面覆盖有聚-L-乳酸的聚乙醇酸聚合体支架上 Baez 2000 因为组织工程创建组织,往往需要支架塑形的帮助。而这种支架实际是一些组织相容性好,又可以在体内生物降解,并通过代谢排出的物质,聚乙醇酸即是其中之一 Baez 2000 将种植有软骨细胞的聚合体支架,或作为对照研究的无软骨细胞种植的聚合体支架,分别植入到无胸腺鼠的阴囊内,一个月后对回收到的聚合体支架进行研究 Baez 2000 发现软骨细胞种植者,聚合体支架表面产生一层白色的软骨结构,组织学检查证实是成熟的软骨细胞,而软骨细胞未种植者,不出现此层软骨组织 Baez 2000 进一步对软骨细胞形成的聚合体支架作分析,发现聚合体支架内的纤维间隙中,已经有相当多的软骨细胞深入生长,并逐步替代了正在不断降解减少的聚合体支架纤维 Baez 2000 此种组织工程睾丸假体,是软骨细胞逐步进展性生长,进而压缩聚合体支架,最终替代聚合体支架, 具有天然软骨的特性,并具有一定的弹性,更具有良好的组织相容性 Baez 2000 阴茎海绵体组织工程************** 采集人类阴茎海绵体平滑肌细胞,接种到聚乙醇酸为主体的聚合体支架上,经过培养、生长与增殖,结果从大体或组织学观察,聚合体支架上形成多层阴茎海绵体平滑肌细胞 Kershen 2002 采用人类阴茎海绵体平滑肌细胞及人类内皮细胞,分别接种于生物降解聚合体上,经过培养与增殖,从回收的材料上看到,结果形成了不同的组织结构,包括平滑肌细胞,内皮细胞, 还有血管的形成 Park 200
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