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蛋白质含量测定法 考马斯亮兰法（Bradford法） 实验原理 考马斯亮蓝G-250染料+碱性芳香族氨基酸 在磷酸的作用下，最大吸收为595nm(兰色） 器材与试剂 722型和753型可见光分光光度计 漩涡混合器 试管16支 标准蛋白质溶液，用牛血清清蛋白（BSA），配制成1.03mg/ml和0.103mg/ml。 考马斯亮兰G-250染料试剂：称100mg考马斯亮兰，溶于50ml 95%的乙醇后，再加入120ml 85% 的磷酸，用水稀释至1升。 实验方法 标准方法 取10支试管，分别编号后按 表1-1 剂量依次加入标准蛋白（或未知蛋白）、去离子水和考马斯亮兰染料。每支试管加完后，立即在漩涡混合器上混合。 加完染料20min后，使用722分光光度计（灵敏度4），塑料比色皿，在595nm处测量吸光度A595。 用标准蛋白浓度（mg/ml）为横坐标，用A595为纵坐标，进行直线拟合，得到标准曲线。根据测得的未知样品的A595，查表即可求得未知样品的蛋白质含量。 微量法 取10支试管，分别编号后按 表1-3 剂量依次加入稀释的标准蛋白（或未知蛋白）、去离子水和考马斯亮兰染料。其他步骤同上，不过使用753分光光度计（狭缝4）。 SDS干扰实验 取5支试管，分别编号后按表1-5剂量依次加入标准蛋白、SDS、去离子水和考马斯亮兰染料。每支试管加完后，立即在漩涡混合器上混合。 加完