微生物vbnc状态形成及复苏机制-微生物学报.pdfVIP

微生物学报 A cta Microbiologica Sinica 2018, 58(8): 1331-1339 /actamicrocn DOI: 10.13343/ki.wsxb Review 综 述 微生物 VBNC 状态形成及复苏机制 张硕，丁林贤，苏晓梅* 浙江师范大学地理与环境科学学院，浙江 金华 321004 摘要：99%以上的微生物因处于活的但非可培养(viable but non-culturable ，VBNC)状态而无法分离培养。 复苏促进因子(resuscitation-promoting factors ，Rpfs)是培养获取VBNC 菌的最重要突破。结合课题组近 十余年从环境功能视角利用Rpf 复苏培养VBNC 菌的研究，本文在阐述微生物VBNC 状态的形成及复 苏进展的基础上，从 VBNC 菌形成及复苏过程出发，探究“探索因子”与群体感应的内在关系。并总结 了课题组利用Rpf 所复苏培养的具有潜在环境功能的VBNC 菌种。本论文将为揭示微生物VBNC 状态 的形成及复苏机制提供新的思路，并为认识和重新评价Rpf 法复苏培养 VBNC 菌在污染环境微生物修 复中的作用提供理论依据。 关键词：VBNC ，Rpfs ，群体感应，“探索因子” ，环境功能 对不可培养微生物的培养及其机制的研究一 尚不明确。近年来Epstein[2]提出了一种“探索因子” 直是微生物领域的研究热点和难点。活的但非可 假说，假说中随机形成的“探索因子”有助于解释 培养(viable but non-culturable ，VBNC)状态是非芽 VBNC 状态的形成及复苏。值得注意的是，探索 孢形成菌抵御不良环境的生存机制[1] 。VBNC 状态 因子出现的随机性与群体感应(quorum sensing ，QS) 广泛存在于已培养和未可培养的微生物中，它是 系统中活化细胞出现的随机性相类似。虽然 QS 在特定条件下，微生物不可分离培养的一种状态。 调节的并非都是应激机制，但其本质是种群密度 据报道，99%以上的微生物因处于VBNC 状态而 或细胞直接向环境扩散速率的指标，它可以发生 无法分离培养。因此，研究VBNC 状态形成及复 在单个物种或不同物种之间，也可以调节许多不 苏的机制对于揭示不可培养微生物的存在机理具 同的过程[3] 。探究“探索因子”与群体感应的内在关 有重要意义。 系有望为揭示微生物VBNC 状态的形成及复苏机 目前，微生物VBNC 状态形成及复苏的机制 制提供一定依据。 基金项目：国家自然科学基金 ；浙江省科技计划项目(2017F30030) ；浙江省自然科学基金(LQ17D010002) *通信作者。Tel ：+86-579；E-mail ：purple@ 收稿日期：2017-08-23 ；修回日期：2017-11-05 ；网络出版日期：2017-11-28 1332 Shuo Zhang et al. | Acta Microbiologica Sinica , 2018, 58(8) 微生物VBNC 状态的诱导与复苏的研究主要 可培养细胞数的 150 倍[9] 。随后，Staley 和Konopka 集中于医学和流行病学领域。甚少研究关注潜在 在前人的研究基础上发现了“平板计数巨大异常 环境功能菌群的VBNC 状态。近十余年，我们课 (great plate count anomaly)”这一重要现象，该现 题组致力于利用藤黄球菌复苏促进因子 象揭示了平板菌落计数与实际细胞计数之间的差 (resuscitation-promoting factor ，Rpf)复苏培养污染 异[10] 。随着分子生物学的发展，越来越多的不可 环境中潜在的VBNC 功能菌群，以提高土著微生 培养微生物利用测序手段被发现[11] 。微生物不可 物的活性及获得高效污染物降解菌。目前，利用 培养的原因较为复杂，如个别微生物由于生长速 藤黄球菌 Rpf 从森林、海岛、沙漠土壤、富营养 度极慢或菌落极小而导致其无法短期生长至肉眼 化水体、难降解有机废水及持久性有