氨基酸的分离鉴定—纸层析法网201111.pptVIP

氨基酸的分离鉴定——纸层析法;一、实验目的;二、实验原理;三、实验器材;四、实验试剂; 实验试剂 ;五、实验操作;（2）规划：带上手套，取宽约12cm、高约20cm的层析滤纸一张。在纸的下端距边缘2cm处轻轻用铅笔划一条平行于底边的直线A，在直线上做3个记号（×） ，记号之间间隔3cm，这就是原点的位置。另在距左边缘1cm处画一条平行于左边缘的直线B，在B线上以A、B两线的交点为原点标明刻度（以厘米为单位），参见左图。; （3）点样：用毛细管将各氨基酸样品分别点在中间3个记号（×）上，风干后再点一次。每点在纸上扩散的直径，最大不超过3 mm。每人须点3个样，其中2个是已知样，1个是待测样品。; （4）层析：用双面胶将滤纸粘成筒状，点样面向外，纸的两侧边缘不能接触且要保持平行，参见图3-3。向培养皿中加入扩展剂，使其液面高度达到1cm左右，将点好样的滤纸筒直立于培养皿中（点样的一端在下，扩展剂的液面在A线下约1cm），罩上大烧杯，仍用塑料薄膜密封。当展开剂上升到8～10cm，取出滤纸，剪断双面胶连线，立即用电吹风热风吹干。;（5）显色：用喷雾器在通风厨中向滤纸上均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液，然后立即用热风吹干，即可显出各层析斑点，参见左图。;（6）计算各种氨基酸的Rf值，并判断混合样品中都有哪些氨基酸，各人将自己的实验结果贴在实验报告上，见表