罗丹明基类分子荧光探针在丙酮酸细胞内可视化-中国药科大学学报.PDF

学 报 ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１８，４９（１）：７９－８６ ７９ 罗丹明基类分子荧光探针在丙酮酸细胞内可视 化成像中的应用 １，２ ３ １，２ 王　硕 ，孙晓艳 ，陈金龙 １ ２ （中国药科大学药学院药物分析系，南京２１０００９；中国药科大学药物质量与安全预警教育部 ３ 重点实验室，南京２１０００９；江苏省中医药研究院分子与细胞生物实验室，南京２１００２８） 摘　要　为了进行生物体内丙酮酸含量变化的可视化研究，筛选了若干螺酰肼结构的罗丹明基探针分子，在水相中与丙酮 酸分子中的活性羰基发生席夫碱反应，螺环单元自发打开，特征荧光和紫外吸收增强。研究发现，罗丹明６Ｇ酰肼对丙酮酸 响应灵敏度最高，５６５ｎｍ处荧光强度变化与丙酮酸浓度０２～１２０ ｍｏｌ／Ｌ范围内呈良好线性相关，检测限低至０１ ｍｏｌ／Ｌ，专 μ μ 属性高，体内常见生物分子和阴阳离子、活性氧化物等对丙酮酸的检测几乎无干扰，并在非小细胞肺肿瘤细胞Ａ５４９、肾上 皮细胞２９３Ｔ中成功实现了外源性丙酮酸的荧光成像，同时实现了经双酚Ａ诱导的细胞内源性丙酮酸的荧光成像。 关键词　丙酮酸；荧光探针；罗丹明６Ｇ；荧光成像 中图分类号　Ｏ６５７３　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１８）０１－００７９－０８ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ 引用本文　王硕，孙晓艳，陈金龙罗丹明基类分子荧光探针在丙酮酸细胞内可视化成像中的应用［Ｊ］．中国药科大学学报，２０１８，４９（１）： ７９－８６ Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＷＡＮＧＳｈｕｏ，ＳＵＮＸｉａｏｙａｎ，ＣＨＥＮＪｉｎｌｏｎｇＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｈｏｄａｍｉｎｅｂａｓｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｂｅｓｉｎｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｅｌ ｌｕｌａｒｐｙｒｕｖｉｃａｃｉｄ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１８，４９（１）：７９－８６ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｒｈｏｄａｍｉｎｅｂａｓｅｄｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｍｏｌｅｃｕｌａｒｐｒｏｂｅｓｉｎｖｉｓｕａｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆｃｅｌｌｕｌａｒｐｙｒｕｖｉｃａｃｉｄ １牞２ ３ １牞２ ＷＡＮＧＳｈｕｏ 牞ＳＵＮＸｉａｏｙａｎ牞ＣＨＥＮＪｉｎｌｏｎｇ １ ２ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＡｎａｌｙｓｉｓ牞ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牷ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆ ３ ＤｒｕｇＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｖｉｇｉｌａｎｃｅ牗ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ牘牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牷Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＣｅｌｌｕｌａｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ牞ＪｉａｎｇｓｕＰｒｏｖｉｎｃａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆ