《细胞入生物学》110 核糖体.pptVIP

第十一章 核糖体 2 成分 由rRNA和核糖体蛋白组成的亚细胞颗粒，位于细胞质内。 16S类（包括18S）中最大的大于1800nt，哺乳动物的18S rRNA却只有12S，大约950nt。 rRNA二级结构相似，螺旋区碱基保守。 单股rRNA链自行折叠形成螺旋区和环区，螺旋区的碱基保守性较强。 酵母 23S rRNA有6个结构域。其中Ⅴ的中心环对转肽酶活性十分重要 核糖体的位点 E位点 Ribozyme 具有催化功能的RNA 肽酰转移酶 mRNA剪接 RNA聚合、RNA磷酸化、氨酰化、烷基化 练习与思考题 30S亚基为扁平不对称颗粒。 大小为5.5×22×22nm。 由头(占1/3)和体(占2/3)组成，头和体间的部分是颈，并有1-2个突起称为叶或平台。 50S亚基呈三叶半球形。 大小为11.5×23×23nm。 大亚基由半球形主体和三个突起组成。中间突起（鼻）是5SrRNA结合之处，两侧突起分别称为柄(stalk)和脊(ridge)。柄含L7和L12；脊含L1，脊又称L1肩(L1 shoulder)。 70S核糖体直径约22nm。 小亚基斜(45°角)卧在50S亚基的L1肩和中心突之间。 30S小亚基与大亚基结合面观 核糖体的体外人工重建 核糖体亚基的自我装配(self-assembly)过程不需其它任何因子参与，只要把rRNA和相应的蛋白质加入反应系统即可自动装配。 电子显微镜术 免疫学方法 中子衍射技术 双功能试剂交联法 不同染料间单态-单态能量转移测定 活性核糖体颗粒重建等方法。 完成对E. coli核糖体52种蛋白质氨基酸序列及三种rRNA一级和二级结构的测定。 核糖体蛋白的功能至今仍知之甚少。 核糖体蛋白和rRNA的许多位点相互作用，决定了核糖体的结构和性质。 核糖体蛋白对所要翻译的mRNA有选择性。 核糖体蛋白参加核糖体蛋白基因表达的自我调节。 美国著名的洛斯阿莫斯科学实验室的专家率先在世界上模拟生命中的一个基本遗传过程——活细胞中有超过100万个原子参与的蛋白质“组装”，为此科学家动用了一台全球最大功率的计算机。 洛斯阿莫斯科学实验室研究人员借助于Q machine超级计算机再现生命诞生过程。在此过程中，核糖体----生命细胞中最神秘要素之一通过原子“构建”成蛋白质分子，在模拟时总共有264万个原子参与，超过以前类似的计算机模拟规模的6倍。 　 核糖体是生命的特殊基础，是传送保存在DNA、蛋白质中信息的特殊媒介，也是我们今天可以研究的从诞生生命以来最古老的证据。 为了模拟构建蛋白质的作用过程，动用了一台安装有9000个微处理机的超级计算机，并连续工作了260天。目前科学家对超短曝光时间拍摄的照片感到满意，照片只是抓拍了过程的片段。问题在于，促使蛋白质产生的核糖体工作时间仅为2纳秒，即使把它看作“瞬间”也实在太短。 拍摄的短片由2000万个镜头组成，对于药理学家，特别是研制抗菌素的药理学家非常有用，短片能演示核糖体的工作机理，远比看图片要详细得多。 将编码26S rRNA前体DNA克隆到细菌中，并在无细胞系统中转录成26S rRNA前体分子。结果发现这种人工制备的26S rRNA前体分子在没有任何蛋白质催化剂存在的情况下，切除了前体分子中的内含子。这种现象称为自我剪接（self-splicing），这是人类第一次发现RNA具有催化化学反应的活性，具有这种催化活性的RNA称为核酶。 Thomas Cech 因发现了核酶而获得1989年诺贝尔化学奖。 核酶的证实实验 模拟生命 第十一章 核糖体 第十一章 核糖体 第十一章 核糖体 * Robinson＆Brown 1953发现于植物细胞，Palacle 1955发现于动物细胞。Roberts 1958 建议命名为核糖核蛋白（ribosome），简称核糖体。 在一个旺盛生长的细菌中，大约有20000个核糖体，其蛋白占细胞总蛋白的10%，RNA占细胞总RNA的80%。 核糖体类型与结构 第十一章 核糖体 第一节 真核生物细胞质中 细菌、线粒体和叶绿体中 70S核糖体 80S核糖体 1 类型 第十一章 核糖体 蛋白按照一定的顺序与RNA结合，组成两个核糖体亚单体，其中RNAs是骨架结构。 约40%蛋白质 约60% RNA 28S 18S 5S+5.8S 第十一章 核糖体 讨论1 提取细胞总RNA，电泳后带型是怎样的？为什么？ 核糖体组成 第十一章 核糖体 3 结构 核糖体模型视频 rRNA 不同生物rRNA分子大小相差悬殊 28S