金线莲抑制斑马鱼黑色素形成的活性组分筛选及机理研究-遗传.PDF

Hereditas (Beijing) 2017 年 12 月, 39(12): 1178 ―1187 研究报告 金线莲抑制斑马鱼黑色素形成的活性组分筛选及机理 研究 1 1 1 1 1 1,2 1,3 许璟瑾 ，张文娟 ，王静怡 ，姚丽云 ，潘裕添 ，欧一新 ，薛钰 1. 闽南师范大学，福建省菌类活性物质工程技术研究中心，漳州 363000 ； 2. 上海交通大学生命科学技术学院，上海 200240 ； 3. 膜生物学国家重点实验室，北京 100101 摘要 : 为探索金线莲中对黑色素形成具有抑制效果的活性组分，本研究对金线莲进行分离、提取，获得总提组、 醇沉组与醇提组，利用斑马鱼筛选金线莲具有美白作用的活性组分。将受精后0.75 h 的斑马鱼胚胎分别暴露于 不同浓度的金线莲总提组、醇沉组、醇提组，72 h 时观察结果表明，金线莲醇提物能有效抑制斑马鱼胚胎黑色 素和黄色素沉着，浓度越高抑制效果越明显，且不影响胚胎生长发育。进一步采用半定量 PCR 和整胚原位杂 交技术定量和定性地检测黑色素形成相关基因 mRNA 表达，结果表明金线莲醇提物可以有效降低 silv 、tyr 和 tyrp 1a 等黑色素合成相关基因的转录水平，且具有浓度依赖关系。通过检测酪氨酸酶活性显示，加入醇提物的 实验组其酪氨酸酶活性随着处理浓度升高而逐渐降低。此外，在黑色素已经大量形成的情况下，金线莲醇提物 仍可通过下调黑色素合成相关基因的 mRNA 表达及酪氨酸酶活性来抑制黑色素的形成，并且这种抑制效果可 在金线莲醇提物撤除后得到恢复。上述实验结果表明，金线莲醇提物能显著抑制斑马鱼黑色素的形成，本文为 金线莲在美白产品领域的开发和应用方面提供了有力支撑。 关键词 : 斑马鱼；金线莲醇提物；黑色素；基因表达；酪氨酸酶 The active component screening of Anoectochilus roxburghii and the functional study on inhibition of melanogenesis in zebrafish 1 1 1 1 1 1,2 Jingjin Xu , Wenjuan Zhang , Jingyi Wang , Liyun Yao , Yutian Pan , Yixin Ou , Yu Xue1,3 1. Fujian Engineering Technology Research Center of Mushroom Industry, Minnan Normal University, Zhangzhou 363000, China; 2. School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China; 3. State Key Laboratory of Membrane Biology, Beijing 100101, China Abstract : The aim of this study is to explore the active components of Anoectochilus roxburghii capable of inhibiting 收稿日期: 20 17−05−15; 修回日期: 20 17−08−02 基金项目: 福建省自然科学基金项目(编号：2015J05070) ，福建省教育厅科技项目(编号：JK2015028)和闽南师范大学杰出青年科研人才计划(编 号：MJ14007)资助[Supported by the Natural Science Foundation of Fujian Province(No. 2015J05070), the Education Scientific Research Project of Fujian Province (No. JK2015028) and Outstanding Youth Resear