中山大学遗传学课程PPT《第五章 分子水平上的基因功能》.pptVIP

第五章 分子水平上的基因功能 教学提纲 1、关于遗传本质探索的三个著名实验。 2、DNA的基本性质。 3、基因的分子结构。 4、DNA与蛋白质。 5、基因的功能。 6、基因的精细结构。 7、基因表达的调控！。 第一节 关于遗传本质探索的三个著名实验 1、Avery的肺炎球菌转化实验。 2、Hershey和Chase的噬菌体感染实验。 3、Fraenkel-Conrat的烟草花叶病毒实验。 一、DNA作为主要遗传物质的间接证据： 细胞内各类物质的含量： 一、DNA作为主要遗传物质的间接证据（续） 1．含量： 　　　DNA含量恒定。体细胞DNA含量是配子DNA的一倍； 　　多倍体DNA含量倍增，但细胞内蛋白质含量不恒定。 2．代谢： 　　利用放射性与非放射性元素进行标记，发现： 　　DNA分子代谢较稳定；其它分子一边形成、同时又一边分解。 3．突变： 　　紫外线诱发突变时，最有效波长均为2600埃； 　　与DNA所吸收的紫外线光谱一致； 　　证明基因突变与DNA分子的变异密切联系。 一、DNA作为主要遗传物质的间接证据（续） 4．分布： ①．DNA是所有生物染色体所共有： 　　噬菌体、病毒、植物、人类等。 ②．而蛋白质则不同： 　　　　　噬菌体、病毒、细菌的蛋白质一般不存在于 　　　染色体上，而真核生物染色体中有核蛋白。 三、Hershey和Chase的噬菌体感染实验 结论： 　　进入菌内的是DNA；DNA进入细胞内才能产生完整的噬菌体。 第二节 DNA的基本性质 既然DNA是遗传信息的携带者，那么它们的结构是怎么的？它们又是怎样来实现其传递遗传信息的功能的？ 三、DNA的复制 半保留还是全保留复制？ DNA复制时，如果原来的两条链保持完整，但互相分开，作为新链合成的模板，各自进入子DNA分子中，这种复制形式叫做半保留复制。 但是理论上全保留复制也是可能的。即两条DNA亲代链保留在一起作为子链合成的模板。 Which is the correct one? 1、DNA的半保留复制 　半保留复制的方法为： 　①．一端沿氢键逐渐断开； 　②．以单链为模板，碱基互补； 　③．氢键结合，聚合酶等连接； 　④．形成新的互补链； 　⑤．形成了两个新DNA分子。 　　DNA的这种复制方式对保持 生物遗传的稳定性是非常重要的。 2、DNA复制的分子机制的研究-Cairns的巧妙实验 1963年Cairns将大肠杆菌培养在含有3H-胸腺嘧啶核苷的培养基（热培养基）上，DNA复制时，放射性同位素就掺入到DNA中。在热培养基中经过不同时间的培养使DNA经历不同次数的复制后，从细菌细胞中抽取DNA，飘浮到膜上，经放射自显影后，再在电子显微镜下观察。DNA复制一次后，因为只有一条链是新合成的，有放射性，因此电镜下观察到一个由小点构成的圆圈。当环形DNA双链在热培养基中进入第二次复制周期，可以看到一个眼球状的结构，两侧各有一个Y型复制叉，放射自显影图中三个区段的粒子密度不同，中间的弧形区段粒子密度最高，它代表两条新链，分别是在第一和第二复制周期合成的，外圈的粒子密度较小，表示它是由一条非放射性的旧链和一条放射性新链组成。 复制是单向的还是双向进行的？ 1972年，Prescotl和Kuempel进行了另一个巧妙的实验：将E.coli生长在含有3H-胸腺嘧啶核苷的培养基上使同位素掺入到DNA上，在DNA上有低水平的3H存在，有刚好足够的3H使X-胶片曝光后可见到复制起点处的DNA痕迹（轻标记），然后，将这些细胞短时间暴露在感光乳胶后，他们发现在伸长的染色体的两端有两条短的高密度银粒的痕迹，对这一结果的唯一解释是DNA正在从原点出现同时向两个方向复制。这就证明了DNA的复制是双向的。 单复制起点和多复制起点 原核生物的DNA内有一个复制起点。而真核生物的DNA长度约为E.coli的数百倍，它们有多个复制起点。 四、原核生物DNA合成 ㈠、有关DNA合成的酶： 共性：只有5’→3’聚合酶的功能，DNA链只能由5’向3’延伸； 　　　DNA合成必须在引物引导下进行； 　　　具有外切酶的活性、合成过程中的错误校正功能。 ㈡、DNA复制过程 1．DNA双螺旋的解链 * DNA解旋酶在ATP供能 下，每分钟旋转3000次 解开双螺旋； * 单链DNA结合蛋白马上 结合在分开的单链上， 以避免产生单链内配对； * DNA拓扑异构酶来解决 由于复制叉的推进而产 生超螺旋的问题。 2.　DNA合成的开始 合成DNA片段之前， 先由RNA聚合酶合成一小 段RNA引物(约有20个碱基 对) ??DNA聚合酶才开始 起作用合成DNA片段。 3.　后随链的不连续复制 构成DNA的两条核苷酸链是逆向平行的，当复制叉向两侧推进时，如果在起始点的一侧合成方向为5‘-3’，而另一侧的