成像流式细胞术在细胞自噬及血液学研究中的应用.pdfVIP

中国科技论文在线 成像流式细胞术在细胞自噬及血液学研究 # 中的应用 张素萍，袁娜* 5 （苏州大学唐仲英血液学研究中心，苏州 215123 ） 摘要：本文初步探索了成像流式细胞仪在细胞自噬及血液学研究中的应用。细胞自噬水平通 常用 LC3 聚集的程度来表示，荧光染色后，成像流式仪内置的Spot count 模块可对细胞内 聚集的荧光斑点数进行统计，得出一个细胞群体的整体的自噬水平。本文以急淋白血病细胞 697 为对象，饥饿HBSS 以及Baf A1 处理细胞，成像流式细胞仪检测细胞自噬水平，Spot count 10 模块统计细胞内的自噬斑点数，结果显示饥饿可显著激活细胞自噬水平，斑点数从对照组的 19.8±1.8 到饥饿组的37.4 ±3.9,(P0.05)。Rapamycin 及 HBSS 处理细胞，成像流式细胞仪 检测白血病融合蛋白 E2A/Pbx1 与自噬蛋白 LC3 的共定位程度，Co-localization 模块分析结 果显示共定位百分比在对照，HBSS 和 Rapamycin 组分别为 17.5 ±0.8,23.3 ±1.2,28.1 ± 2.9,(P0.05) ，药物 Rapamycin 和饥饿 HBSS 可提高细胞蛋白的共定位程度, 白血病融合蛋白 15 可能通过自噬途径降解。 关键词：细胞生物学；成像流式细胞术；细胞自噬；蛋白共定位；血液学 中图分类号：Q2-33 Application of image flow cytometry in cell autophagy and 20 hematology study Zhang Suping, Yuan Na (Cyrus Tang Hematology Center, Soochow University, Suzhou 215123) Abstract: This study explored the Application of image flow cytometry in cell autophagy and hematology study. Autophagy level is usually measured by autophagy plot of LC3 spot in cells. 25 The LC3 spot count could be statisticaled by the spot count wizard in image flow cytometry and the cell autophagy level was analyzed. Acute lymphoblastic leukemia 697 cells were used in this study. Cells were treated with starvation of HBSS, Bafilomycin A1 or combined to measure the LC3 spot conut. It showed that the spot increased from