课件：溶血性贫血实验室检查.pptVIP

* * * 4、G6PD荧光斑点试验和活性测定 原理: G6PD 使NADP还原成NADPH, 后者在紫外线照射下发出荧光 参考值： 正常人强荧光； 酶活性 5 U/gHb 6-磷酸葡萄糖 NADP GSH H202 氧合血红蛋白 6-磷酸葡萄糖酸 NADPH GSSG H20 高铁血红蛋白 G-6PD 5、丙酮酸激酶荧光筛选试验和活性测定 原理: ADP + PK 磷酸丙酮酸 丙酮酸 NAPH 乳酸 NAD（无荧光） 参考值 正常PK活性荧光在20min内消失 酶活性15.1±4.99U/gHb 临床意义 PK严重缺乏（纯合子）荧光60min不消失 杂合子荧光25~60min消失 (三)、珠蛋白合成异常的检测 血红蛋白的结构 原卟啉 血红素 Hb（四聚体） 铁 2条α链 珠蛋白：由4条多肽链组成 2条非α链 正常人 HbA（?2?2） 97% HbA2（?2?2）1.5-3% HbF（?2 ?2） 0.5-0.8% 血红蛋白病 珠蛋白肽链量的不正常(地中海贫血) 血红蛋白分子结构异常(异常血红蛋白病) 遗传性溶血性疾病 1.血红蛋白电泳 蛋白质的两性性质—是由氨基酸的NH+与COO- 决定的。 等电点—调节水溶液的pH，能使蛋白质的NH+与COO- 数目相等呈电中性， 此时蛋白质无电泳，在水中电解度小，并发生沉淀。 电泳：一个带电荷的离子或胶体颗粒在电场中可向一极移动。 原理：在一定的pH缓冲液中，缓冲液的pH大于Hb等电点，其带负电，在电场中向阳极移动；反之向阴极移动。 由于各种Hb珠蛋白肽链结构不同，其等电点不同，电泳方向和速度亦不同，故可分离出不同的区带，对区带进行电泳扫描，可进行Hb定量分析。 (+) H J K A G D E (-) 1. HbH增多是HbH病，为α-地中海贫血的一种；HbA2明显增高见于轻型β地中海贫血；HbF 明显增高见于中重型β地中海贫血。 2. 正常值：醋纤法（PH8.6）HbA 96%~98% ，HbA2 1.0%~3.1% ， HbF＜2% 电 泳 结 果 CA A2 F A 异常 正常 2.胎儿蛋白HbF （?2 ?2）酸洗脱试验：含HbF红细胞着色 原理： HbF抗酸力强 临床意义： 脐带血、新生儿、婴儿阳性 成人小于1% 地中海贫血轻者少数红细胞阳性 地中海贫血重症阳性细胞增多 3.HbF定量测定（碱变性试验）: 原理： 碱性溶液中HbF不易变性沉淀，可测定滤液中Hb量 临床意义： 2岁-成人 HbF2%，4%为异常 重型 ?地贫80-90% AL、AA、淋巴瘤等可轻度升高 4.HbA2定量测定 诊断轻型?地贫的重要依据 5.限制性内切酶谱分析 基因诊断 (四)、自身免疫性溶血性贫血检测 自身免疫性溶血性贫血 （autoimmune hemolytic anemia,AIHA) 定义：体内免疫异常，产生自身抗体、补体，结合在红细胞膜上使红细胞破坏加速 病因：尚未完全阐明，可能因素：病毒感染可激活多克隆B细胞或化学物与红细胞膜相结合，改