课件：食品检验技术第三章.ppt

常用培养基的制备技术 培养基制备的基本方法和注意事项 培养基成分的称取 各成分的混合和熔化 培养基pH的初步调整 培养基的过滤澄清 培养基的分装 培养基的灭菌 培养基的质量测试 培养基的保存 常用培养基的制备技术 营养琼脂培养基配方及制法 蛋白胨 10g 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15-20g 蒸馏水 1000mL 将琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂熔化，分装。121℃高压灭菌15min。 培养基的分装及斜面摆放 成品培养基：这种培养基是将新鲜配制的液体培养基用喷雾干燥法，真空干燥法，低温干燥法或蒸发干燥法等将培养基内所含的水分去掉；或将培养基内的各种固形成分，经适当处理，充分混匀，便成干燥粉末而成。使用时只要按比例加入一定量的水，经溶解，无需调pH，分装，高压蒸汽灭菌，即可使用。 成品培养基很容易吸潮，在称量时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把药匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再取另一种药品。瓶盖也不要盖错。 在烧杯融化琼脂的过程中，人要在电炉旁看着，以免培养基因沸腾而溢出烧杯。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦。注意带上棉纱手套防止烫伤。 分装过程中，注意不要使培养基沾在管口上，以免沾污棉塞而引起污染。 注意事项 培养基分装好后，塞上棉塞，外面再包一牛皮纸，便可灭菌。灭菌的时间和温度按各培养基规定进行，以保证灭菌效果和不损坏培养基的必要成分。培养基经灭菌后，可放在37 ℃恒温箱培养24小时，无菌者方可使用。 在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽灭菌和干热灭菌。一般培养基和灭菌水等用高压蒸汽灭菌，而玻璃器皿常用干热灭菌。蒸汽灭菌为121℃，15-20分钟，干热灭菌为160-170℃，2小时。目的都是使细菌体内蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。在同一温度下，湿热杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固，同时湿热穿透力强，而且当蒸汽与被灭菌物体接触凝成水分时，又可放出热量，使温度迅速增高，从而增加灭菌效力。 培养基灭菌 培养皿：以旧报纸密密包紧，一般以6～8套做一 包，待灭菌。 吸管：在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段1.5cm长的棉花。棉花要塞得松紧恰当（过紧，吹吸液体太费劲；过松，吹气时棉花会下滑），然后分别将每支吸管尖端斜放在旧报纸条的的近左端，与报纸约呈60o角，并将右端多余的报纸打一小结。 三角玻扒：跟包扎吸管相似，将三角部分斜放在报纸条的近左端，与报纸约呈45o角，并将右端多余的报纸打一小结。 包扎 灭菌 关好排水阀门放入清水至标度为止。 将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中，关上器盖。 通电加温，同时打开排气活门，当有大量蒸汽排出后维持5min，排尽锅内的空气，再关闭活门。 当达到所需温度时开始计时，并在此温度下保持所需的时间。 灭菌完毕，不可立即开盖取物，须关闭电源，待压力自然下降，当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时，方可打开锅盖取出物品。 最后将高压灭菌器内的剩余水排出。 放置斜面 后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！ 致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求 * * * * 学习重点 了解染色的基本原理。 掌握常用染料的性质及其染液的配制技术。 掌握常用试剂、缓冲溶液、物质的量浓度的 配制技术。 了解培养基的种类及一些常见培养基的用途， 掌握一般培养基的配制技术。 一、染料的种类 染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为 酸性染料（如伊红、刚果红、藻红、苯胺黑、苦味酸等） 碱性染料（如美蓝、甲基紫、结晶紫、碱性复红、中性 红、孔雀绿和番红等。） 中性（复合）染料 单纯染料 第一节 染料及染液配制技术 第一节 染料及染液配制技术 二、染料的使用