Pichia酵表达系统使用心得及蛋白酶控制.docxVIP

Pichia酵母表达系统使用心得 ? HYPERLINK / \t _blank 生物通编者按：甲醇酵母表达系统有不少优点，其中以Invitrogen公司的Pichia酵母表达系统最为人熟知，并广泛应用于外源蛋白的表达。虽然说酵母表达操作简单表达量高，但是在实际操作中，并不是每个外源基因都能顺利得到高表达的。不少人在操作中会遇到这样那样的问题， HYPERLINK / \t _blank 生物通编者特地收集了部分用户在使用EasySelect Pichia Expression System这个被誉为最简单的毕赤酵母表达的经典试剂盒过程中的心得体会。其中Xiang Yang是来自美国乔治城大学（Georgetown University）Lombardi癌症中心（Lombardi Cancer Center），部分用户来自国内。 甲基酵母部分优点 与其他真核表达系统比较 与原核表达系统比较 1.属于真核表达系统，具有一定的蛋白质翻译后加工，有利于真核蛋白的表达优点 - + 2.AOX强效启动子，外源基因产物表达量高，可以达到每升数克表达产物的水平 +++ + 3.酵母培养、转化、高密度发酵等操作接近原核生物，远较真核系统简单，非常适合大规模工业化生产。 +++ = 4.可以诱导表达，也可以分泌表达，便于产物纯化。 = + 5.可以甲醇代替IPTG作为诱导物，部分甲醇酵母更可以甲醇