ABA、SA预处理对水分和盐胁迫下水稻DNA甲基化水平影响.doc

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学位论文独创性声明 本人所呈交的学位论文是在导师的指导下取得的研究成果。据我所知, 除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人已经发表或撰写过 的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中作了 明确说明并表示了谢意。 作者签名:  日期: 学位论文使用授权声明 本人授权沈阳师范大学研究生处,将本人硕士学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索;有权保留学位论文并向国家主管部门或其 指定机构送交论文的电子版和纸质版,允许论文被查阅和借阅;有权可以 采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文 在解密后适用本规定。 作者签名:  日期: ABA、SA 预处理对水分和盐胁迫下水稻 DNA 甲基化水 平的影响 摘 要 干旱胁迫和盐胁迫是两个重要的环境胁迫因子。由于干旱和盐胁迫对农业生产造成 巨大的危害,严重影响粮食产量,因此二者对植物影响的研究受到了广泛重视。 本文以水稻(Oryza sativa L.)为试材,研究了在水分胁迫(PEG 模拟)下和盐胁迫 (NaCl)下水稻 DNA 甲基化的变化规律,揭示水稻对水分、盐胁迫的响应机制;同时 研究了脱落酸、水杨酸预处理对水分和盐胁迫下 DNA 甲基化的影响,实验预处理方法 为:挑选籽粒饱满的水稻种子,用 1 mmol/L 水杨酸(SA)和 0.1 mmol/L 脱落酸(ABA) 溶液浸种。 主要结果如下: 本文对水稻基因组 DNA 提取和纯化方法进行比较,通过 CTAB 法 I 和 CTAB 法 II 对水稻 DNA 提取和纯化:CTAB 法 I 在提取和纯化 DNA 时,加入适量的 RNA 酶,除 去 DNA 中残留的 RNA 的效果较好,尽可能减少 RNA 对高效液相体系检测结果的影响, 保证实验的准确性;对高效液相法(HPLC)进行 DNA 总甲基化水平测定的体系进行 了优化,测定水稻叶片 DNA 甲基化总体水平的最佳色谱条件:流动相为甲醇:磷酸二 氢钾(10 mmol/L)(10:90,V/V),pH 3.5 左右,流速 0.5 ml/min,柱温 35 ℃,C18 柱 (250 mm)是最佳的色谱条件。 水分和盐胁迫下处理组 DNA 甲基化水平要明显高于对照组各个时期的总甲基化水 平,这说明逆境胁迫会导致 DNA 总甲基化水平的升高。 ABA、SA 两个预处理组及对照组(未予处理)在受到水分胁迫后,DNA 甲基化水 平均呈上升趋势。0 h 至 4 h,ABA、SA、CK 组上升均较快,SA 和 CK 组在 4 h 到达 了最高值,而 ABA 预处理组胁迫后 4 h 接近最高峰值,且 CK 组明显高于两个预处理 组;4 h 至 24 h,ABA 组达到最高值,而 SA 组和 CK 组则缓慢降低;24 h 至 144 h, CK 组又呈缓慢升高趋势,而 ABA 和 SA 预处理组则呈缓慢降低趋势。由此说明 ABA、 SA 预处理在一定程度上降低了因水分胁迫而导致 DNA 甲基化水平的升高。 ABA、SA 两个预处理组及对照组(未予处理)在受到盐胁迫后,DNA 甲基化水平 均呈上升趋势。0 h 至 4 h,ABA、SA、CK 组均呈明显增高趋势且未到达最高值;4 h 至 24 h 时 ABA 和 CK 组 DNA 甲基化水平到达了最高值,而 SA 预处理组仍未到达最 高值;24 h 至 144 h,ABA、CK 组呈下降趋势,说明 ABA 预处理在盐胁迫时期内缓解 了 DNA 甲基化水平的升高;而 SA 预处理组则仍在继续升高但升高幅度减小。 关键词:水稻,水分胁迫,盐胁迫,脱落酸,水杨酸 The effects of ABA or SA Pretreatment on the total level of DNA methylation under water and salt stress Abstract Drought and salt are very important factors of environmental stress. Because of the great damages to the production in agriculture, researchers attach importance to the effects on drought and salt stress. The sdudy is about determination on total level of DNA methylation of leaf in rice seedlings. And the pretreatment with abscisic acid (ABA) and salicylic acid (S

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